MS-RDA的改进及在白背飞虱的应用研究*

甲基化敏感性代表性差异分析方法（MS-RDA）适用于特异、低丰度基因组DNA甲基化的筛查与鉴定，已大量应用于哺乳动物的疾病发生和植物发育机理方面的研究，但昆虫中尚未发现该方法的应用。从DNA提取、酶切、扩增子制备、消减杂交等方面对该方法进行了改进，并在水稻重要害虫白背飞虱上得到成功应用，获得了4条与雌、雄性别相关联的特异性甲基化差异条带，其中有3条序列已被GenBank收录，登陆号分别为JX847621、JX624161、JX472453，经BLAST比对，有3条未发现同源性序列，属于功能未知的新基因；同时还获得了2条与长短翅型相关联的特异性甲基化差异条带，也已被 GenBank 收录，登陆号分别为 JX514031、JX472454，同源性分析发现与多种动物的18S核糖体和28S核糖体RNA基因序列高度相似，因此有关核糖体基因的甲基化可能对白背飞虱的翅型分化起到一定的调控作用。     

早稻不同生育期水稻-白背飞虱-拟水狼蛛食物链的能流动态研究

以能量为统计标准,系统地分析了不同水稻生育期稻田生态系统中水稻－白背飞虱（Sogatella furcifera)-拟水狼蛛（Pirata subpiraticus)的种群能流动态。结果表明：稻田能流分析法比单纯种群数量动态调查法更能科学、准确地反映不同水一育期白背飞虱的危害程度以及拟水狼蛛对白背飞虱的不同控制水平。早稻全期,同化效率：水稻＞白背飞虱＞拟水狼蛛;生长效率相反;白背飞虱的林德曼效率和消费效率明显低于拟水狼蛛。虽然在整个早稻期间白背飞虱出现两次（分蘖期、乳熟期）种群能量高峰期,但水稻各生育期的生态效率显示：拟水狼蛛对白背飞虱有良好的控制效应,唯有乳乳期为白背飞虱危害早稻较为严重的时期。     

MSAP在水稻害虫白背飞虱中的应用研究

甲基化敏感的扩增多态性分析方法 (MSAP)是在扩增片段长度多态性技术基础上建立起来的主要用来检测样品基因组DNA甲基化情况的一种方法,特别适用于全基因组范围内检测CCGG位点的胞嘧啶甲基化情况,在高等动物和许多植物上已广泛应用,但尚未有在昆虫中应用该方法的报道。从DNA提取、酶切基因组DNA用量、酶切和接头连接时间、电泳图谱显影方法等方面对MSAP方法进行了改进,并在水稻重要害虫白背飞虱上得到成功应用。这为将来在其它昆虫中使用该方法研究基因组DNA甲基化情况提供了一定借鉴和指导价值。且通过比较白背飞虱雌雄性别间和长短翅型间的MSAP图谱,发现雌雄性别间和长短翅型间的基因组DNA甲基化式样都存在明显的差异,说明DNA甲基化可能参与了性别和翅型分化的调节。     

江西早稻白背飞虱主害代虫源性质的研究

根据宜春和赣州稻区10年的虫情资料,分析了早稻白背飞虱主害代虫源性质.结果表明:宜春稻区早稻白背飞虱主害代虫源以5月下旬至6月上旬当地田间虫源和前期迁入虫源为主,近期迁入虫源亦有较大的补充作用.赣州稻区主害代虫源由5月下旬至6月上旬的田间虫源和近期迁入虫源构成,早期迁入虫源对主害代影响很小.     

Wolbachia 在中国稻田飞虱中的感染和传播

用ＰＣＲ方法检测了采集于不同地域的稻田飞虱共生菌Ｗｏｌｂａｃｈｉａ的感染,发现灰飞虱Ｌａｏｄｅｌｐｈａｘ ｓｔｒｉａｔｅｌｌｕｓ,褐飞虱Ｎｉｌｅｐａｒｖａｔａ ｌｕｇｅｎｓ,白背飞虱Ｓｏｇａｔｅｌｌａ ｆｕｒｃｉｆｅｒａ 为Ｗｏｌｂａｃｈｉａ所感染。克隆了编码Ｗｏｌｂａｃｈｉａ外膜蛋白质的ｗｓｐ基因并进行了序列测定,对ｗｓｐ的ＲＦＬＰ分析证实了这些飞虱为单一Ｗｏｌｂａｃｈｉａ感染,还发现一种能同时     

白背飞虱取食为害后水稻植株光合作用能力的变化与抗虫性的关系

本文研究了不同抗虫水稻品种在白背飞虱为害后稻株光合作用能力的变化与抗虫性的关系。结果表明 ,稻株受害后 :感虫品种 (TN1和汕优 6 3)光合作用速率和叶绿素含量下降率比抗虫品种 (N2 2 )明显 ;汕优 6 3和 N2 2品种的二磷酸核酮糖 (Ru BP)羧化酶的含量和活力均增加 ,TN1品种在为害 5天时 Ru BP羧化酶的含量和活力明显增加 ,而在为害 10天时反而低于健康稻株 ;感虫品种受害后叶片光合产物滞留比抗虫品种多 ,即感虫品种光合产物向叶鞘、茎、分蘖和根等部位的转移量少于抗虫品种。     

早稻白背飞虱数量预测的研究：相关矩阵分析法

运用相关矩阵分析法预测赣州早稻白背飞虱主害代发生量，历史符合率达１００％。对１９９３年虫情作出预报，预报结果与发生实况完全相符。     

白背飞虱不同虫态的空间分布型及变动规律

经过对白背飞虱不同虫态在同一生境内空间格局进行连续测定,表明其仅在田间初始低密度情况下呈现随机或均匀分布,一般均为聚集分布．分布参数显示白背飞虱种群为负二项分布,基本成分是个体群;低龄若虫有较高的聚集度;高龄若虫及成虫活动能力强,空间分布图式趋于个体;不同虫态平均密度（Ｘ）与方差（Ｓ２）用负二项分布曲线公式Ｓ２＝Ｘ＋Ｘ２／Ｋｃ配合良好;采用种群聚集均数（λ）测定,平均密度２．５５头／丛是判定聚集原因的临界值．采用Ｉｗａｏ理论抽样模式,得出不同密度下的理论抽样数,并建立序贯抽样模式,可应用于田间抽样．