质谱技术的新进展及其在生命科学中的应用

文章综述了质谱技术的新进展与CZE/MS/MS,MALDI-TOF-MS,LC-ESI-MS等质谱新技术及它们在生命科学中的应用.指出这些质谱新技术已被证明在多肽和蛋白质的鉴定、单核苷酸、核酸、糖蛋白的分析等领域是很有效的工具.     

Identification of proteinaceous binding media for the polychrome terracotta army of Emperor Qin Shihuang by MALDI-TOF-MS

A proteinaceous binding media for the polychrome terracotta army of Emperor Qin Shihuang has been identified using matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry(MALDI-TOF-MS).Methods for the preparation of the model samples and the elimination of interferences have been evaluated,as well as ageing processes.A method involving the complexation of EDTA in combination with dialysis was used to eliminate any interference in the polychrome layers taken from the historical samples.The model samples were aged by being buried in loess to replicate the ageing process of the historical samples as closely as possible.The optimum conditions for the extraction and subsequent enzymatic hydrolysis of the extracted protein were investigated.Under the optimized conditions,the‘‘peptide mass fingerprints’’of the proteinaceous binding media from the historical and model samples were determined by MALDITOF-MS.The results revealed that animal glue was used as the binding media for the polychrome layers of Emperor Qin Shihuang’s terracotta army.It also shows that animal glue used as binding media has a long history in China.     

液质联用研究人重组干细胞因子一级结构

通过高效液相色谱(HPLC)和质谱技术,对人重组干细胞因子(rhSCF)分子进行分析,以确证其一级结构.将rh-SCF样品胰酶酶切,HPLC-RPC分离,基质辅助激光解吸附电离-飞行时间串联质谱仪(MALDI-TOF-MS)对rhSCF的酶切肽段进行解析,并对rhSCF的O-糖基化和N-糖基化位点进行了分析.结果:(1)rhSCF分子质量得到测定;(2)rhSCF的一级结构得到确认,测定的肽质量谱的覆盖率达到94%,分子中有两对二硫键;(3)鉴定了样品中的N-糖基化位点,并对rhSCF产品的O-及N-连接糖型上的糖结构进行初步探讨.结果显示:rhSCF一级氨基酸序列和二硫键形成位置与理论上一致,糖基化特性符合毕赤酵母表达蛋白的糖基化特点.     

质谱技术的新进展及其在生命科学中的应用

文章综述了质谱技术的新进展与CZE/MS/MS,MALDI-TOF-MS,LC-ESI-MS等质谱新技术及它们在生命科学中的应用.指出这些质谱新技术已被证明在多肽和蛋白质的鉴定、单核苷酸、核酸、糖蛋白的分析等领域是很有效的工具.     

COC1/DDP亚细胞中波形纤维蛋白的肽质谱指纹分析

目的寻找与鉴定卵巢癌耐药株中的差异表达蛋白质。方法应用高分辨二维凝胶电泳分离卵巢癌细胞中差异表达的波形纤维蛋白,并通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对其进行分析与鉴定。结果获得了分辨率和重复性均较佳的凝胶电泳图谱,图像分析显示波形纤维蛋白表达明显下调。结论与其他方法相比,应用凝胶电泳和生物质谱联用技术分析与鉴定未知蛋白具有简单快捷的特点。     

胎儿宫内发育迟缓疾病标志物的初步研究

目的筛选胎儿宫内发育迟缓大鼠血清中差异表达的蛋白质,寻找与胎儿宫内发育迟缓相关的疾病标志物。方法收集大鼠疾病正常组、IUGR组血浆各3例;TCA法沉淀血清蛋白,建立疾病组和正常组蛋白质的双向凝胶电泳图谱;ImageMaster分析软件分析差异蛋白质;飞行时间质谱（MALDI—TOF—MS）获得差异蛋白肽指纹图谱,MASCOT引擎搜索蛋白质种类。结果鉴定出个差异蛋白点3个,分别为：IGF—I、IGF-Ⅱ、IGFBP-3。结论IGF—I、IGF-II、IGFBP-3,可能是胎儿宫内发育迟缓疾病诊断的生物标志物。     

MALDI-TOF-MS法测定芍药苷-人血清白蛋白复合物的半抗原数

为建立中药活性成分的抗体测定技术平台，将中药活性成分芍药苷与人血清白蛋白偶联成完全抗原（半抗原-蛋白质复合物），并利用基质辅助激光解吸电离-飞行时间-质谱（MALDI-TOF-MS）技术测定了上述人工抗原的基本质谱特征，求得了芍药苷-人血清白蛋白复合物的半抗原数（hapten number）为12．试验结果表明，利用MALDI-TOF-MS方法测定人工合成的半抗原-蛋白质复合物的质谱特征等，具有所需样品量少、结果准确和迅速可靠等优点，为药用植物活性成分的抗体技术研究提供了科学方法和试验依据，对于判断人工抗原的质量具有科学意义．     

HPLC和MALDI-TOF-MS法分析重组人钙调磷酸酶B亚基的纯度和肽图谱

用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法对重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB)的纯度和肽图谱进行了测定,以比较不同批次产品的纯度及其一级结构的一致性,对其进行质量控制.并用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法进行验证.结果表明,运用梯度洗脱RP-HPLC法能对样品进行纯度检查和肽图谱分析,测得3批样品纯度均达到98%以上,肽图谱能达到批间一致.同时用MALDI-TOF-MS法测定,纯度结果二者相符,质谱肽图经计算机辅助分析,确证rhCNB一级结构与天然CNB一致.证明该方法灵敏、准确、可靠.     

质谱技术的新进展及其在生命科学中的应用

文章综述了质谱技术的新进展与CZE MS MS ,MALDI-TOF -MS ,LC -ESI-MS等质谱新技术及它们在生命科学中的应用 .指出这些质谱新技术已被证明在多肽和蛋白质的鉴定、单核苷酸、核酸、糖蛋白的分析等领域是很有效的工具 .