生物荧光素酶的活性与固相化

目的：探讨荧光酶的活性和稳定性，方法：酶亚单位重聚酶固相化，结果：获得稳定，高活性的荧光酶，结论：亚单位重聚和酶固相化是酶稳定性和活性的保证。     

异硫氰酸荧光素-酚藏花红双发光磷光探针测定DNA

以Pb2＋为离子微扰剂时,酚藏花红（PF）与异硫氰酸荧光素（FITC）均能在滤纸上分别发射强而稳定的室温磷光（RTP）信号;当两者混合时,发现PF和FITC的RTP信号均显著增强;而1.12 ag DNA spot-1均使PF和FITC的RTP信号剧烈增强,在634与659 nm处PF和FITC的ΔIp与DNA含量成线性关系,据此建立了FITC-PF双发光磷光探针测定蛋白质的新方法.该方法的检出限（LD）分别为14zg DNA spot–1（PF）和18zg DNA spot–1（FITC）,灵敏度高,并成功用于花蜜样品中DNA含量的测定.同时探讨了FITC-PF双发光磷光探针测定痕量DNA的反应机理.     

兰属植物DNA指纹图的研究

采用ＬＺＦ－１寡核苷酸探针和限制性内切酶Ｈｉｎｆ１,检测兰属２３样株和石斛属１样株的ＤＮＡ酶解片段,获得了清晰易读的由６－１５条带组成有特异性的遗传指纹图谱。表明：（１）ＬＺＦ－１探针能与兰属及石斛属植物基因组ＤＮＡ中的酶解片段中简单重复序列形成杂交分子,证实近缘植物基因组中存在同源ＤＮＡ片段;（２）在介于１－２４ｋｂ的谱带中,大红朱砂（Ａ）１５条,３株红蝉（Ｂ）皆１２条,Ａ＊ＢＦ１２ｎ＝４０两株     

荧光素磷酸酯的合成研究

本文用荧光素和三氯氧磷作用合成了荧光素单磷酸酯和二酯,并就有关的反应条件进行了研究和讨论。     

NBS-荧光素-CTAC流动注射化学发光体系测定尿素的含量

报道了NBS 荧光素 CTAC流动注射化学发光体系测定尿素含量的分析方法 .在碱性条件下 ,荧光素作为能量转移剂 ,N 溴代丁二酰亚胺 (NBS)氧化尿素产生化学发光 ,十六烷基三甲基氯化铵 (CTAC)对该体系具有强烈的增敏作用 .研究了影响化学发光的各种因素 ,对可能的机理进行了探讨 .化学发光信号与尿素的质量体积浓度在 9× 10 -9～ 1× 10 -4g/mL范围内呈线性关系 .方法的相对标准偏差RSD值为 4 .6 % (5× 10 -8g/mL ,n =11) ,检出限 (3σ)为 3.0× 10 -9g/mL .本法已经成功地运用于人体尿液中尿素含量的测定 .     

聚荧光素薄膜修饰电极的制备

利用循环伏安法(CV)研究了荧光素(FS)在玻碳电极表面电聚合成膜的条件以及聚荧光素薄膜修饰电极(PFSE)的电化学性质.电聚合体系为:PBS(pH6.8) 0.1mol/L NaNO3 1.0×10-4 mol/L FS.将PFSE放入HCl溶液中进行循环伏安扫描,发现CV图中峰电流的大小与HCl浓度相关.当PFSE在1.0 mol/L HCl溶液中以不同的扫速进行循环伏安扫描时,CV图中峰电流的大小与扫描速率在V≤100mV/s范围内呈良好线性关系,相关系数为0.998 9.此外,PFSE对儿茶酚类物质也具有良好的电催化作用,可用于该类物质的分析测定.     

荧光淬灭法测定人发样中的铜

本文研究了在酸性介质中,以荧光素(Flzcorescein)为荧光试剂的荧光淬灭法测定微量铜的方法.建立了最佳测试条件,其最佳激发波长和荧光波长分别为439.7nm和510.3nm,反应的适宜酸度范围pH2.00～7.10,铜含量在0.0～0.2μg/ml范围内成直线关系,回收率为96.5％～98.3％,符合方法学的要求,用于人发中铜含量的测定与原子吸收法比较结果基本一致.     

荧光猝灭法快速测定环境样品中的邻苯二甲酸二丁酯

用荧光光谱法研究了邻苯二甲酸二丁酯（DBP）与荧光素（HFIn）的荧光性质,建立了一种简单、快速、灵敏测定邻苯二甲酸二丁酯的新方法。结果表明：在pH=6.0的NaAc-HAc缓冲溶液中,加入邻苯二甲酸二丁酯使荧光素的荧光猝灭,体系的激发波长和发射波长分别为487nm和532nm。HFIn的荧光强度差值与DBP的含量在0.2～8.0mg/L范围内呈良好线性关系,检出限为0.092mg/L。应用于水样和一次性塑料袋中痕量邻苯二甲酸二丁酯的测定,结果满意,并进行了加标回收实验。     

发光杆菌荧光素酶的提取

建立荧光素酶的提取方法。方法 饱和硫酸铵分步提取；亲和层析和离子交换层析纯化；聚丙烯酰胺凝胶电泳测分子量。结果 得到分子量为79ku的荧光素酶。结论 建立了稳定、可靠的荧光素酶提取方法。     

超氧化物歧化酶的异硫氰酸荧光素脂质体的研究

在pH9.5的0.5mol/LNa_2CO_3缓冲液中,异硫氰酸荧光素(FITC)标记牛血超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD),经层析得到纯化的FITC-SOD;用逆相蒸发法制得含FITC-SOD的逆相蒸发囊泡(REV)即(FITC-SOD)-LUV,将含(FITC-SOD)-LUV与游离的FITC-SOD的混合物,通过—Sepharose4B层析柱,合并洗脱后的A_(620)峰即为(FITC-SOD)-LUV.