人tumstatin基因的克隆、表达和抗体制备

应用PCR技术从人胎肺cDNA文库中扩增tumstatin基因编码序列,克隆至pET-3c载体构建非融合表达的重组质粒pET-3c-tum,并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中获得高效表达.表达蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离、切胶回收后免疫新西兰大白兔,获得ELISA效价高达1∶1 000的特异性兔抗人tumstatin抗血清.     

人tumstatin基因的克隆、表达和抗体制备

应用PCR技术从人胎肺cDNA文库中扩增tumstatin基因编码序列，克隆至pET-3c载体构建非融合表达的重组质粒pET-3c-tum，并在大肠杆菌E．coli B121（DE3）中获得高效表达。表达蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分离、切胶回收后免疫新西兰大白兔，获得ELISA效价高达1：1000的特异性兔抗人tumstatin抗血清。     

丹参水提取物对去卵巢大鼠血脂和肝脏的影响

为研究丹参的雌激素样作用,将32只6月龄SD大鼠随机分成假手术组(Sham)、去卵巢手术组(OVX)、阳性对照17β-雌二醇治疗组(E2,1mg.kg-1.d-1,灌胃)和丹参治疗组(SM,600 mg.kg-1.d-1,灌胃),治疗12周后,检测大鼠体重的增加情况、子宫指数、血脂水平、血清转氨酶活性及抗氧化情况,并进行肝脏的组织学检测.结果显示,丹参水提取物治疗12周能明显抑制去卵巢诱导的大鼠体重的增加,刺激萎缩的子宫生长,改善血脂水平,降低丙氨酸氨基转氨酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转氨酶(AST)的活性,减轻肝脏的脂肪变性.丹参水提取物的这些保护作用,可能与其能降低氧化剂丙二醛(MDA)水平,增加超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活性有关.     

嗜铬粒蛋白N区抗真菌活性片段研究

为寻找高效低毒的抗真菌药物,利用PCR技术扩增了编码人嗜铬粒蛋白N端18-76、18-66和31-76位氨基酸(CGA18-76、CGA18-66和CGA31-76)的DNA片段,将之克隆进枯草杆菌诱导型表达载体pSBPTQ,获得3种重组质粒pSC18-76、pSC18-66和pSC31-76,转化枯草杆菌DB1342。SDS-PAGE分析结果显示:经蔗糖诱导后,CGA18-76、CGA18-66和CGA31-76片段分别在枯草杆菌工程菌中获得表达,产物分泌到细胞外。表达量分别为5.6 mg/L、5.3 mg/L和5.6 mg/L。利用孔穴琼脂扩散法检测表达产物的抗真菌活性,并与CGA1-76进行比较,发现CGA18-76、CGA18-66和CGA31-76对烟曲霉菌、黄曲霉菌、石膏样小孢子菌和白念珠菌均有抑制作用,并以CGA31-76对白念珠菌的抑制作用为最强,CGA18-66对除白念珠菌之外的另3种测试真菌的抑制作用较强,而CGA18-76对测试真菌的抑制作用最弱。