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常规PCR与RACE结合法快速从cDNA文库中克隆基因   总被引:1,自引:0,他引:1  
首先根据Fe(Ⅱ)-转运蛋白基因家族的保守区设计同源的常规PCR引物(F1,R1),扩增出490bp的特异片段。然后根据RACE法原理,巧妙地设计3′RACE(F2)和5′RACE(R3)特异性引物,使两者既能分别与文库载体上的筛选扩增引物配对扩增cDNA 3′和5′末端序列,又能使扩增出的3′RACE和5′RACE产物序列有重叠部分;另外设计引物时还兼顾到使F2和R3也能配对,从而能对3′RACE和5′RACE扩增产物进行双特异性引物常规PCR鉴定。该方案不但能够直接根据序列鉴定3′RACE和5′RACE产物是否为同一基因序列,还能快捷地用常规PCR鉴定3′RACE和5′RACE扩增产物是否为特异性扩增,避免了对非特异性扩增产物的克隆测序等繁琐的鉴定过程,优化了基因克隆策略。最后根据拼读出的全长序列设计引物(F4,R4)扩增出完整编码区。应用该方法成功地从小金海棠缺铁处理的根系cDNA文库中克隆了Fe(Ⅱ)-转运蛋白基因的cDNA。说明该方案是一种从cDNA文库中克隆目的基因的快捷优化方法。  相似文献   
2.
国家创新系统理论的演变评述   总被引:3,自引:0,他引:3  
国家创新系统理论是用于分析研究国家竞争力、产业竞争结构的重要理论 ,在指导国家宏观政策方面有着十分重要的作用。本文以发展时间为序 ,试图描绘出国家创新系统理论的演变过程 ,评述在此期间所出现的各种流派 ,并对该理论今后的发展方向做出一定的探讨。  相似文献   
3.
同层均匀物体的引力场   总被引:2,自引:0,他引:2  
针对密度非均匀分布的物体,提出了密度梯度的概念,并讨论了在密度同层均匀分布的情况下,轴对称和球对称的引力场。  相似文献   
4.
针对密度非均匀分布的物体,提出了密度梯度的概念,并讨论了在密度同层均匀分布的情况下,轴对称和球对称的引力场  相似文献   
5.
椭圆形线电荷的轴向电场分布   总被引:2,自引:0,他引:2  
通过坐标变换求出了椭圆形线电荷的轴向场强及电位分布规律,并对结果进行了分析讨论。  相似文献   
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