秋水仙素诱导青虾次级卵母细胞二倍体初探

以青虾卵巢为材料，采用秋水仙素诱导多倍体次级卵母细胞．经滴片试验，确立此实验最佳滴片高度为1．5cm，通过设置5个秋水仙素浓度(0．08～0．40mg／mL)及3个作用时间(6～24h)，观察发生染色体加倍的细胞相对数目．实验结果表明：在使用秋水仙素的浓度为0．08～0．40mg／mL，处理6～24h时都可以获得多倍体卵细胞．在秋水仙素浓度是0．32mg／mL，处理6h可得到最高二倍体突变率(32．58％)．还测试了0．32mg／mL COM作用6h时ATPase活性与生理盐水对照组的变化，结果显示COM会在一定程度上影响细胞的新陈代谢．但是50％左右的成活率表明，这种诱导突变的方法仍具有一定的应用价值．     

青虾精子超低温冷冻保存技术的研究

本文对青虾精子的超低温冷冻保存技术进行了研究.采用台盼兰染色法检测低温冷冻后青虾精子的活力,研究了3种稀释液(壬氏液,Kurokura extender,D-20)和3种冷冻保护剂(8%DMSO,12.5%甘油,10%甲醇)对青虾精子在超低温冷冻保存时的保护效果,以及不同保存时间后青虾精子活力的变化.结果表明,青虾精子以壬氏液为稀释液,添加8%DMSO作为抗冻保护剂,4℃平衡30 min,-20℃平衡15 min,-80℃平衡15 min后投入液氮中保存,解冻时将冷冻管浸入55℃水浴中10~15 s至半融取出自然解冻,精子能维持60%的存活力.本研究为青虾精子冷冻保存库的建立提供了实验依据和理论基础.