不同诱导方式对6-methylsalicylic acid在酿酒酵母（S．cerevisiae）中表达的影响

聚酮类化合物（Polyketids,PKS）是自然界广泛存在的由真菌或放线菌等微生物产生的,具有一系列复杂结构的微生物次生代谢产物,其中很多种类已经被开发成为具有抗菌、抗癌、抗肿瘤活性的药物．来源于Penicillium patulum中的6-MSAS（6-methylsalicylic acid synthase）是为数不多的几类从基闪水平到合成酶体系都已被完全阐明的真菌类PKS种类之一．本研究通过对摇瓶发酵的突变型菌株（S．cerevisiae334）在表达过程中诱导剂添加的时间和剂量对6-MSA合成的影响进行分析,结果表明：除24h和48h之间没有差异之外,在其他不同的诱导时间之间均为极显著差异．其中24h时加入诱导剂可以获得最高的6-MSA合成产量,为104．51mg·L^-1,在不同的诱导剂剂量的处理中,不同诱导剂剂量对最终产物的表达产量有极显著差异．其中添加w=10％的β-半乳糖诱导获得了最高的表达产量,为121．61mg·L^-1,不同的诱导方式在组合会对6-MSA的表达产生极其显著的差异．     

椰子不同组织基因组DNA的提取及质量分析

以椰子植物的叶片和花序组织为材料,探索了应用CTAB微量法分离高质量椰子基因组DNA的方法.结果表明,采用CTAB的缓冲液裂解材料,以及在提取过程中用φ=4%的β-巯基乙醇的改良CTAB法,可有效地控制椰子这种高纤维、易褐变材料和多糖在DNA提取过程中的污染和影响.应用本研究建立的分离方法,可从椰子的叶片和花序2种不同材料中分离得到高质量的基因组DNA,产量分别达0.75 g.L-1和0.65 g.L-1.通过Hind III酶切实验证明,分离出的基因组DNA适用于限制性酶切反应的分析和操作;该方法的建立可有效地应用于椰子和其他棕榈科植物基于DNA的分子生物学研究.