一株日本鳗鲡肠道乳酸菌SOD酶基因克隆表达与应用研究

为了解决日本鳗鲡抗生素滥用的问题,探究能够替代抗生素的微生态制剂,从日本鳗鲡肠道中筛选益生菌乳酸菌,克隆其SOD酶基因,并在大肠杆菌中进行表达,将SOD酶、益生乳酸菌同基础饲料配制成3组不同的饲料饲喂鳗鲡后进行血液生化指标分析.实验结果表明,益生菌、SOD酶以及乳酸菌和SOD酶制成的复合酶饲养的鳗鲡的血清总蛋白相对于对照组分别提高2%、8%、18%;葡萄糖相对于对照组分别提高64.8%、19.1%、79.7%;超氧化物歧化酶相对于对照组分别提高10.7%、25.4%、47.1%.各项指标提示添加乳酸菌、SOD酶蛋白有利于日本鳗鲡的生长,在一定程度上提高宿主的抗病能力和免疫性能.     

重组毕赤酵母AiiA蛋白表达量的双抗体夹心ELISA测定

利用双抗体夹心ELISA的方法,建立了能对重组毕赤酵母表达Aii A蛋白进行定量测定的方法.双抗体夹心ELISA方法建立的标准Aii A蛋白曲线显示,随着Aii A蛋白质量浓度增大,显色后A410值增大,在Aii A质量浓度为1.11~35.5μg·m L-1的范围内具有良好的线性关系.经方法学分析表明,该方法对含有Aii A蛋白的发酵样品的检测具有良好的特异性和精确度,Aii A的检测限为0.80μg·m L-1,批内差异系数和批间差异系数分别为5.22%和10.30%.测定8.86,2.22,1.11μg·m L-13个质量浓度回收率分别为104%、97.3%和102%,能够满足定量要求.