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选择来源于极端嗜热菌Thermosipho melanesiensis(DSM12029)的普鲁兰酶基因,以购自德国菌种保藏中心的基因组为模板,扩增出普鲁兰酶基因TM-pulA;利用酶切酶连构建了重组质粒pET21a-TM-pulA;转入大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中诱导表达并经纯化后,进行了水解产物分析和酶学性质测定.结果显示:TM-pulA为Ⅰ型普鲁兰酶,最适pH为5.8;最适温度是80℃;70℃下半衰期为4.75 h;Mn~(2+)、Co~(2+)、AL~(3+)、Fe~(3+)、SDS及EDTA对其酶活有不同程度的抑制作用;该酶的K_m、V_(max)、K_(cat)及K_(cat)/Km值分别为4.68 g·L~(-1)、0.0085 mmol·L~(-1)·s~(-1)、71.18 s~(-1)、15.21 L·g~(-1)·s~(-1). 相似文献
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地黄块根膨大过程中土壤化感物质含量及微生物数量变化研究 总被引:3,自引:0,他引:3
以怀地黄为实验材料,对地黄块根膨大速率动态变化及地黄根际土壤中的潜在化感物质阿魏酸、香草酸、香草醛、对羟基苯甲酸含量的动态变化进行了研究分析.结果表明:①块根膨大速率动态变化呈一双峰曲线,第1个高峰出现在栽秧后70~130 d,第2个高峰出现在栽秧后150~190 d.②根际土壤中的阿魏酸、香草酸、香草醛含量变化与块根膨大速率变化动态相似,对羟基苯甲酸表现为先上升后下降;阿魏酸与地黄块根的膨大正相关;地黄块根膨大过程中根际土壤放线菌、真菌数量均明显增加,根际微生物可能将地黄根系分泌物进行生物转化生成了导致地黄连作障碍的酚酸类化感物质. 相似文献
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多绳提升机是一种新型的矿井提升设备。由于它的结构紧凑,金属耗用量小,在深井提升时上述优点尤为突出等特点,某些国家已不再生产单绳提升机而由多绳提升机来代替。我国也在大力发展多绳提升机,已经进入系列化设计和批量生产的阶段。主导轮是多绳提升机的主要承载部件。它的结构是轴对称的,但是外载荷不对称,这种在任意外载荷作用下的弹性园柱壳,造成了理论研究的复杂性。国内外对主导轮的理论研究大体上可归纳为三类:一类是以有矩理论为基础的计算方法。计算特点是假定少,控空间解析方程,但其数学难度大,级数的收敛性差,且 相似文献
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从淀粉加工厂附近土壤中筛选得到一株普鲁兰酶高产菌株,编号为Z-13,其初始酶活达到5.7 U/mL.通过对此菌株的16S rDNA比对,以及生理生化鉴定,鉴定此菌株为克雷伯氏菌(Klebsiella variicola),通过发酵条件优化,确定最佳发酵产酶条件为:玉米淀粉1.5%,蛋白胨2.0%,KH2PO40.05%,MgSO4·7H2O 0.01%.装液量为70 L/250 L,培养基最初pH为6.0,发酵温度30℃,摇床转速200 r/min,发酵时间48 h,优化后菌株产普鲁兰酶的酶活高达67.8 U/mL,是优化前菌株产普鲁兰酶活性的11.89倍. 相似文献
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微波辅助提取怀地黄梓醇工艺研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以微波处理为辅助手段,应用水浴法浸提怀地黄中梓醇.对利用微波技术提取怀地黄梓醇的工艺条件进行了研究,通过单因素和正交试验,考察了影响梓醇提取率的因素,微波辅助法提取梓醇的最佳工艺条件为:甲醇体积比50%,料液比1 g:15 mL,在微波功率为400 W条件下处理时间为4 min,再在70℃水浴锅中保温浸提30 min,梓醇提取率在7.3%以上. 相似文献
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利用薄层色谱法(TLC)对地黄(Rehmannia glutinosa)头茬土壤与空白土的差异性化学成分进行系统分析、定位,并通过微生物发酵法对该物质进行了制备、分离与纯化.确定其为地黄连作障碍自毒物质.研究结果表明,地黄头茬土壤的二氯甲烷提取物中存在该物质为麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮,其转化菌株为... 相似文献