Cdk5及p35在NGF撤退诱导的已分化PC12细胞凋亡中的作用研究

目的:探讨Cdk5及p35在神经生长因子(NGF)撤退诱导的PC12细胞凋亡中的作用机制.方法:建立NGF撤退诱导的已分化PC12细胞凋亡模型,Western blotting检测Cdk5及p35在凋亡过程中表达变化情况,利用Cdk5特异性抑制剂Roscovitine预处理已分化PC12细胞,检测其对NGF撤退诱导的凋亡作用影响,向已分化PC12细胞转染真核表达质粒pCMV-p35-IRES-Cdk5,检测过表达CdkS/p35对PC12细胞凋亡的影响.结果:NGF撤退36h会引起已分化PC12细胞出现典型的DNA Ladder凋亡特征,MTT检测结果也显示,NGF撤退对PC12细胞的损伤呈时间依赖性;Roscovitine预处理已分化PC12细胞可以抑制NGF撤退诱导的细胞凋亡率,但不影响Cdk5/p35蛋白表达水平;向已分化PC12细胞中转染真核表达质粒后,能检测到Cdk5/p35蛋白的过表达,并引起PC12细胞出现凋亡样改变.结论:Cdk5及p35的活化与NGF撤退诱导的已分化PC12细胞凋亡过程密切相关,抑制Cdk5的活化有抑制细胞凋亡保护神经元的作用.     

商业银行—中小企业有限次重复博弈仿真

利用在社会经济中得到广泛应用的Multi-Agent仿真方法对银企贷款的博弈过程进行模拟,并利用从银企贷款中抽象出的模型,动态地仿真这一经济过程,对于分析银企贷款行为和解决小企业融资问题有直接意义。本文通过建立有限次重复博弈模型,采用仿真的方法对银行和企业在效益最大化目标下的策略选择进行研究。通过研究表明,不论贷款抵押比率和抵押品变现率如何变动,银行的最大化收益出现在银行和企业的互信行为同时出现的时候,同时整个社会的福利也达到最大化。因此不论对银行还是对整个社会来说,银企合作才是解决企业贷款难问题的最好措施。     

NGF诱导PC12细胞神经元样细胞分化

目的:建立PC12细胞的神经元样细胞分化模型,并探讨ERK蛋白在PC12细胞神经元样细胞分化中的可能机制.方法:以10、20、50 g/L的NGF(NGF溶于PBS,培养基中PBS的终浓度不超过2%)培养PC12细胞,应用倒置相差显微镜、显微镜测微尺及流式细胞仪鉴定PC12细胞的分化,以确定NGF使用剂量.运用免疫印迹检测不同浓度、不同作用时间时ERK蛋白在PC12细胞中的表达,并进行统计学分析.结果:随NGF剂量的升高,PC12细胞的体积、最长突起长度和突起数目均会增大或增多。统计学分析证明50 g/L的NFG作用48 h足以诱导PC12细胞的交感神经样改变。尽管ERK总蛋白水平在NFG作用前后无明显改变,但在NFG作用5 min后磷酸化的ERK蛋白水平即显著升高,达到峰值,并持续约1 h.50 g/L的NFG作用于PC12细胞48 h可使细胞发生明显的G1期阻滞.结论:PC12细胞可在NGF作用下出现交感神经样改变,并且细胞的分化程度依赖于NGF的使用剂量和作用时间.在NGF诱导的PC12细胞神经元样分化中ERK蛋白的磷酸化对NGF呈现剂量和时间依赖性,提示ERK蛋白在分化的早期发挥重要作用.     

藻蓝蛋白裂合酶突变体的构建及其对催化功能的影响

在序列分析的基础上,使用PCR技术构建了藻蓝蛋白裂合酶CpcE／CpcF基因的缺失突变体：cpcE（42～276）、cpcE（1～274）、cpcE（1～272）、cpcF（1～160）、cpcF（10～213）．突变体基因克隆至表达载体pET 30a（＋）后,利用体外重组实验对表达蛋白的酶活性进行了研究．揭示了缺失区域在酶催化过程中的作用．     

物理课如何更好的体现“高效课堂”

＂高效课堂＂充分体现了学生＂自主、合作、探究＂的基本理念,＂五环十步＂是高效课堂的一种模式,通过＂预习、展示、交流、合作、提升＂五大环节,可以充分发挥学生的主体作用,该文结合教学实际探讨了＂物理课如何更好的体现高效课堂＂。     

高校计算机专业课程教学中学生创新能力培养的研究

以目前我国高校计算机专业课程教学中存在的问题为出发点,从教学环境、课程标准、教学资源、教学活动、教师观念等多个维度探索提高计算机专业课程教学中学生创新能力的途径,为培养具有高素质创新型IT人才提供指导.     

藻蓝蛋白裂合酶基因的表达与酶活性研究

为了比较研究层理鞭枝藻藻蓝蛋白裂合酶PcE／F与藻红蓝蛋白裂合／异构酶PecE／F的结构与功能,将藻蓝蛋白裂合酶PcE／F氨基酸序列与其他蓝藻的相应序列进行比较,并进行大量表达,将表达的裂合酶PcE／F用于藻蓝胆素(PCB)与藻蓝蛋白α-亚基(α-PC)脱辅基蛋白(PcA)的体外重组,得到天然活性的α-PC,从而表明层理鞭枝藻中pcE／F所编码的蛋白质是α-PC生物合成的裂合酶．     

藻红蓝蛋白α-亚基体外重组体系的优化

对我们建立的藻红蓝蛋白α－亚基体外重组体系进行了优化。实验表明：让表达的不具有组氨酸亲和标记的藻红蓝蛋白α－亚基连接／异构酶E亚基（简称PecE)与具有组氨酸亲和标记的藻红蛋白α－亚基连接／异构酶F亚基（简称Histag-PecF)共同变异再复性，然后通过Ni^2 金属鳌合亲和层析提纯PecE/Histag-PecF复合物，该PecE/Histag-PeF具有更好的催化活性。     

团体贷款中商业银行-中小企业贷款行为的动态博弈仿真分析

为了解决中小企业贷款的担保问题,同一个工业园区或一个产业链条上企业间的担保贷款,即团体贷款就成为解决问题的一种方式.利用动态博弈模型,采用仿真的方法对团体贷款中影响银企贷款行为的因素进行了研究,得出通过企业的动态学习,均衡下的企业策略随着社会惩罚和外部惩罚的变动而变动.当外部惩罚足够严厉时,这时的企业策略选择不仅仅只比较团体内部各参与人收益大小,还要考虑同团体中其他个体进行比较.     

层理鞭枝藻藻红蓝蛋白裂合异构酶色氨酸环境的光谱探测

应用N-溴化琥珀酰亚胺(N-bromosuccinimide)研究了层理鞭枝藻藻红蓝蛋白裂合异构酶(PecE、PecF)色氨酸的化学修饰,用紫外吸收光谱、圆二色光谱和荧光光谱探测了色氨酸化学修饰过程中蛋白质结构微观环境,发现PecE和PecF的色氨酸都处在疏水区域或带负电荷区域,PecE的色氨酸残基更靠近分子表面.由于色氨酸是藻红蓝蛋白裂合异构酶的必需氨基酸,这些分析加深了解了色氨酸在藻红蓝蛋白裂合异构酶催化过程中的作用.