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以杀虫剂西维因酯解反应中间过渡态的结构信息进行分子设计,合成了α-萘基磷酸氢酯半抗原,将其与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(CEA)偶联,制得了具有不同抗原价(4~22)的合成抗原.经小鼠免疫学实验,优选出了可产生滴度高、特异性强之抗血清的免疫用抗原(Hap-BSA).经酶联免疫吸附试验(ELISA)测定,用该免疫原制得的鼠抗血清滴度可达1∶32000.优选抗原Hap-BSA可被用作产生催化西维因水解之抗体酶的免疫原. 相似文献
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采用合成底物对华南地区腐乳后发酵阶段分离得到的细菌短杆菌属(Brevibacte-rium)菌株DH1、JS3、GH4、DG6和酵母菌SCY1、JSBB2的胞内和胞外肽酶系统进行了测定.实验结果表明,分离得到的细菌菌株具有较高的内肽酶活力,其亮氨酸氨肽酶、精氨酸氨肽酶、二肽酶和羧肽酶的活力很高.而分离出的酵母菌的谷氨酸氨肽酶、赖氨酸氨肽酶活力较高,同时具有很高的二肽酶与羧肽酶活力. 相似文献
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搅拌式光生物反应器培养紫球藻的条件优化 总被引:5,自引:0,他引:5
研究在光生物反应器中搅拌速度、通气量、光照强度和装液量对紫球藻生长的影响.实验结果表明:在摇床培养过程中,紫球藻的生物量和胞外多糖随着三角瓶装液量的减少而增加.通过正交试验对搅拌式光生物反应器的三个培养条件通气量、搅拌转速和光照强度进行优化,获得搅拌式光生物反应器培养紫球藻的最佳条件为通气量120L/h、搅拌转速200r/min和光照强度5000lx,在该条件下紫球藻的生物量为2.548g/L、胞外多糖557.2mg/L.正交试验分析表明,三个培养条件中通气量对藻生物量和胞外多糖含量的影响最明显.通过采用DPS软件对正交实验结果进行二次多项式模型分析和拟合,以生物量和胞外多糖为指标建立回归模型,得到相应的优化条件和预测值. 相似文献
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基因重组质粒稳定性与苯丙氨酸发酵的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究应用具有苯丙氨酸生产基因 pheA~(FR)、aroF~(FR)、CI_(857) 的质粒 pSY130~14和质粒 pS Y16,重组构建了具有苯丙氨酸生产基因系统的新质粒 pSY200-14。然后,使其转化到大肠菌 AT2471中,育成了基因重组菌株 AT2471/pSY200-14。试验表明,新菌株质粒稳定性比原菌株有较大的提高。在2. 5升通气搅拌罐进行苯丙氨酸发酵试验,在搅拌转速850rpm、通气速率1. 0VVM,38. 5℃和 pH7. 0的条件下,发酵48小时苯丙氨酸生成量达14. 2g/L,比原菌株 AT2471/pSY130-14增产11. 8%。 相似文献
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产虾青素红发夫酵母Phaffia rhodozyma的反应器培养 总被引:2,自引:1,他引:2
利用经过优化的简单培养基在5L机械搅拌式生物反应器中对产虾青素红发夫酵母Phaffia rhodozyma进行高密度培养.培养过程分两个阶段:初始阶段以细胞生长为主,大量积累酵母细胞;当细胞浓度达到一定的水平后,在培养中后期流加尿素,促进细胞内虾青素合成,提高虾青素产量.最终得细胞干重为30.8g/L,虾青素产量为28.1mg/L(以单位体积发酵液中的虾青素质量计),虾青素含量为923.2ug/g(以每克干细胞中的虾青素质量计),原料对细胞的转化率为0.359.研究结果为用红发夫酵母大规模培养生产虾青素奠定了基础. 相似文献
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张云峰;魏东;郭祀远;梁世中 《华南理工大学学报(自然科学版)》2009,37(10)
为了高效率地分离决明子中的高纯度活性成分,应用高速逆流色谱法从决明子的乙酸乙酯萃取物中同时分离得到5个单体化合物。两相溶剂系统的固定相为正己烷–乙酸乙酯–乙醇–水(体积比5:3:6:6)的上相,流动相是从正己烷–乙酸乙酯–乙醇–水(体积比5:3:6:6)到正己烷–乙酸乙酯–乙醇–水(体积比5:3:5:7)的梯度洗脱,流速为2.0 mL/min。利用理化常数、质谱(MS)、核磁共振(1H–NMR、13C–NMR)等波谱技术鉴定5个化合物分别为橙钝叶决明素(1)、甲基钝叶决明素(2)、钝叶决明素(3)、大黄素甲醚(4)和大黄素(5)。从500mg粗提物中分得的量分别是90.42mg、45.39mg 、31.84mg、121.71 mg和39.10mg, 纯度分别为97.4%、93.0%、94.8%、96.3%和95.5%,回收率分别为91.5%、96.7%、93.3%、95.6和98.4%。 相似文献
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重组降血压肽多肽序列的设计及表达系统构建 总被引:2,自引:0,他引:2
通过分析降血压肽结构与功能的关系,设计并合成5条降血压肽序列,通过活性测定以及体外消化试验,确定P3(六肽)为理想降血压肽,为实现该小肽在大肠杆菌中的表达,经特定酶切位点将其串联为6拷贝的融合多肽,将相应的基因序列克隆至表达载体pGEX-4T-2并转化至宿主茵Escherichia coli BL21中,双酶切、PCR以及测序结果均表明成功构建了重组质粒pGEX-4T-2-ACEIP。 相似文献
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纳豆激酶基因重组表达载体的构建及其稳定性 总被引:8,自引:1,他引:7
利用PCR方法从分泌纳豆激酶的纳豆杆菌基因组DN中扩增纳豆激酶基因,将该基因克隆到表达载体PBV220上,筛选重组子,通过限制性内切酶和PCR技术分析,初步确定该重组子所携外源基因为纳豆激酶基因,用凝块溶解时间法(CLT)测出表达产物具有溶解血栓活性,证明该基因可在大肠杆菌中表达,对重组菌中重组质粒的稳定性进行研究,结果表明质粒的插入对宿主菌的生长没有太大影响,该质粒在宿主菌中具有良好的分离稳定性,但结构稳定性较差,SDS-PAGE分析结果表明基因产物为分泌型,蛋白表达量占菌体蛋白的12%左右。 相似文献