猪胸腺激素的制备、性质及其功能

本文提出了一个通过部份热变性—硫酸铵沉淀—DEAE纤维索层析等步骤制备猪胸腺激素的方法。所得制品主要是一个由8—9种中性和酸性蛋白质所组成的蛋白混合制剂;分子量从9,000—68,000;不含糖类或核苷酸;具有很高的生物学活性,用微量玫瑰花结法测定,0.1微克蛋白质仍有明显的促使T淋巴细胞成熟的功能。     

猪末端转脱氧核苷酸酶的分离纯化

末端转脱氧核苷酸酶催化脱氧垓苷三磷酸连接到单链多聚脱氧核苷酸的3′—OH末端。猪胸腺匀浆抽提液,经磷酸纤维素吸附层析,硫酸铵分级沉淀,DEAE—纤维素负吸附,葡聚糖凝胶G100过滤和两次羟基磷灰石柱层析,分离后得到该酶,纯化倍数达2736倍。葡聚糖凝胶G100过滤分离出三个活力峰,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示其分子量分别为60000,53000和32000道尔顿,其中53000组分比活最高,达每毫克蛋白3135活力单位。     

用PAT和受体结合分析研究TNF的结构特征

用正电子湮没技术，受体结合分析和Ｌ９２９细胞活力测定等方法研究了天然型ｈＴＮＦ－α和突变型ｈＴＮＦ－ｂ肿瘤坏死因子的结构特征。实验结果表明，在ＴＮＦ－α中珠正电子湮没长寿命和相应强度分别大于和小于ＴＮＦ－ｂ的τ２和Ｉ２，用受体的放射配基结合分析，ＴＮＦ－ｂ对ＨＥＰ－２和Ｕ９８７的ＩＤ５０分别比ＴＮＦ－α低１／２和高４０倍。     

脑肿瘤中p53基因突变的研究

应用ＰＣＲＳＳＣＰ技术及ＤＮＡ 测序技术对３７ 例原发性脑肿瘤及相应外周血淋巴细胞中ｐ５３ 基因５ ～８ 外显子的突变情况进行了检测,结果表明,ｐ５３ 基因在原发性脑肿瘤中的突变频率为１９ ％ （７／３７） ．并且突变频率在不同病理类别脑肿瘤中的分布是非随机的,其中星形细胞肿瘤中的突变频率最高,为３６ ％ （５／１４） ．所有突变均为错义点突变,５７ ％ （４／７） 的突变位于ＣｐＧ位点．突变仅发现于脑组织中,外周血淋巴细胞中未检出突变,这些结果提示,ｐ５３ 基因突变在脑肿瘤的发生发展过程中起一定的作用,ｐ５３ 基因在散发性脑肿瘤中的突变为体细胞型的突变     

胸腺激素对末端脱氧核苷酸转移酶的影响

以TDT为T细胞发育阶段的标志,观察PTH在体外对T细胞发育的影响。PTH可诱导豚鼠骨髓细胞TDT水平增高,此诱导作用受丝裂霉素C和放线菌素D抑制,说明TDT表达与DNA复制和mRNA合成有关;此外,PTH也可使小鼠胸腺细胞TDT水平下降。由此可见,PTH促进T细胞成熟,既作用于T细胞发育早期,亦作用于后一阶段。     

猪胸腺激素与巨噬细胞移动抑制的关系

本文报道了胸腺激素与巨噬细胞移动抑制的相关性,实验结果征明胸腺激素在一定浓度范围内抑制巨噬细胞移动,且具特异性。因此可用来检测胸腺激素的活性。     

一步法免疫亲和层析纯化重组人肿瘤坏死因子

提出一种简便的免疫亲和层析方法，有效地分离纯化重组人肿瘤坏死因子（ｒＨＴＮＦ），此法不需预先分离纯化单克隆抗体．用交联刘ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｂｅｒｉｍｉｄａｔｅ使抗ＴＮＦ的单克隆重抗体和ｐｒｏｔｅｉｎＡ—ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ共价结合，成为稳定的免疫基质，制备免疫亲和层析柱，将重组ＴＮＦ粗制品一步纯化为均一组份．     

鼠转移抑制基因（nm23－1）在大肠杆菌中的高效表达及活力鉴定

肿瘤转移是引起恶性肿瘤患者死亡的主要因素［１］。对肿瘤抑制基因的研究在临床上具有重要意义。ｎｍ２３基因是目前研究得较多和认为最有前途的肿瘤抑制基因，它已从小鼠黑色素瘤细胞系Ｋ－１７３５中克隆得到。有证据表明，来源于人的ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２基因的氨基酸序列分别与人红细胞ＮＤＰＫ的两个亚基Ａ、Ｂ等同，且与果绳ａｗｄ基因高度同源。本实验利用ｐＥＴ表达系统在大肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中高效表达了重组ｎｍ２３－１（鼠源），ＳＤＳ－ＰＡＧＥ扫描结果显示，表达量高达４３．２％。并对其表达产物进行了分离纯化和活力测定，证实ｎｍ２３－１蛋白确实具有ＮＤＰＫ的功能，从而为进一步探讨ｎｍ２３基因家族在抑制癌细胞转移方面的功能打下了良好的基础。     

用PAT和受体结合分析研究TNF的结构特征

用正电子湮没技术（ＰＡＴ），受体结合分析和Ｌ９２９细胞活力测定等方法研究了天然型ｈＴＮＦ－α和突变型ｈＴＮＦ－ｂ肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的结构特征。实验结果表明，在ＴＮＦ－α中的正电子湮没长寿命（τ２）和相应强度（Ｉ２）分别大于和小于ＴＮＦ－ｂ的τ２和Ｉ２，用受体的放射配基结合分析，ＴＮＦ－ｂ对ＨＥＰ－２（仅表达ＴＮＦ－Ｒ５５）和Ｕ９３７（主要表达ＴＮＦ－Ｒ７５）的ＩＤ５０分别比ＴＮＦ－α低１／２和高４０倍。由此可得到一个有意义的结论，ＴＮＦ－ｂ的分子间自由体积减小，导致它的密度和细胞毒活性增大