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张靖溥 《科学通报》2004,49(5):462-467
核质相互作用一直是动物胚胎发育领域的研究焦点, 母体因子对于脊椎动物胚胎发育的启动具有决定性作用. 在已有的研究中, 直接研究母体因子β-catenin基因的时空表达规律与其功能的相关性还较少见, 因此, 我们对该基因在金鱼胚胎发育全程中的作用进行了时空性的跟踪研究. 报道了金鱼β-catenin cDNA全基因序列, 并与斑马鱼的β-catenin cDNA序列和氨基酸序列进行了比较, 结果表明, 两者具有很高的同源性, 分别为93% (2227/2384 bp)和98.5% (768/780 aa); 系统地研究了β-catenin基因在金鱼胚胎发育全过程中的表达规律; 用反义RNA和绿色荧光蛋白基因共注射技术, 直接活体考察了β-catenin基因活性对金鱼胚胎发育的影响. 结果证明, b-catenin在胚胎中的分布是动态的, 主要定位于体轴和背部组织, 以及头尾结构. b-catenin活性的丧失, 导致胚胎背部结构严重缺损和沿前后轴组织发育受阻, 并在幼体形成前死亡, 说明该基因是胚胎启动和发育的必要因子之一.  相似文献   
2.
核质相互作用一直是动物胚胎发育领域的研究焦点, 母体因子对于脊椎动物胚胎发育的启动具有决定性作用. 在已有的研究中, 直接研究母体因子β-catenin基因的时空表达规律与其功能的相关性还较少见, 因此, 我们对该基因在金鱼胚胎发育全程中的作用进行了时空性的跟踪研究. 报道了金鱼β-catenin cDNA全基因序列, 并与斑马鱼的β-catenin cDNA序列和氨基酸序列进行了比较, 结果表明, 两者具有很高的同源性, 分别为93% (2227/2384 bp)和98.5% (768/780 aa); 系统地研究了β-catenin基因在金鱼胚胎发育全过程中的表达规律; 用反义RNA和绿色荧光蛋白基因共注射技术, 直接活体考察了β-catenin基因活性对金鱼胚胎发育的影响. 结果证明, β-catenin在胚胎中的分布是动态的, 主要定位于体轴和背部组织, 以及头尾结构. β-catenin活性的丧失, 导致胚胎背部结构严重缺损和沿前后轴组织发育受阻, 并在幼体形成前死亡, 说明该基因是胚胎启动和发育的必要因子之一.  相似文献   
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由胎儿成纤维细胞而来的克隆山羊(Capra hircus)   总被引:20,自引:3,他引:17  
哺乳动物的克隆是国内外科学研究的热问题。用体外培养的胎儿成纤维细胞作供体细胞不仅可以研究发育生物学中发育与分化的理论问题,而且与早期胚胎细胞作供体细胞相比,大大增加了供体细胞的数量。  相似文献   
4.
核定位蛋白基因在转基因小鼠制备中的应用   总被引:5,自引:0,他引:5  
张靖溥  王玉阁  李光三  沈玉  朱少侠  杜淼 《科学通报》2001,46(20):1717-1721
采用细胞质共注射方法,将目的基因表达构件中α-sl-casein-hG-CSFt和哺乳类核定位基因表达构件导入受精卵细胞质,利用核定位蛋白的定向迁移功能,将目的基因表达构件带入原核,获得转基因小鼠。这种转基因途径不仅可以提高转基因小鼠的出生率,而且整合率达58%(29/50),表达率达75%,用Western blotting方法初步估算表达水平在60-550mg/L乳清。因此这种转基因方法可以替代受精卵原核注射的转基因方法,且效率高、方法简单、实用、便于推广。  相似文献   
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枯草杆菌222-UV 90是为生皮脱毛选育的一株中性蛋白酶产生菌。其亲株222是从变质的黄豆粉中分离得到。变异株222-UV 90是经NTG和UV诱变育种获得。发酵试验表明:500ml摇瓶装量50ml培养基,接种一小铲,32℃摇床培养40小时,产酶为8081μ/ml;BF-12-1型发酵罐32℃发酵36-38小时,产酶为8453u/ml。酶在PH6.0-8.0较稳定,35~40℃时活性稳定,40℃两小时仅失活16.7%。Ca~╫和Mg~╫对酶有激活作用,Fe~╫、Hg~╫和Cu~╫则有抑制作用。聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分析得到11条带。酶制剂使用安全无毒。制革脱毛软化应用试验结果表明:该酶用于猪皮正面革脱毛软化效果很好。每克皮用200 Folin单位的酶,38~40℃,pH7~8,1.5~2.0小时脱毛软化同时达到终点。成革质量达灰碱法水平,且可消除制革脱毛过程中硫化物对环境的污染。  相似文献   
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