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克隆到脂肪芽孢杆菌Bacillus stearothermophilus中的对硝基酚磷酸酶(p-nitrophenylphosphatase,pNPPase)基因,将其编码区eDNA连接到pQE30表达载体中,在E.coli M15中经IPTG诱导得到高效表达.用Ni-NTA Superflow层析柱对表达产物进行了分离纯化,初步测定了pNPPase的酶学性质.发现它的反应最适pH是10.0,最适反应温度是55℃,热稳定性Tm值为52℃,Mg^2 、Mn^2 和Co^2 对pNPPase的活性有一定的促进作用,而Zn^2 和Ni^2 对pNPPase没有影响.纯化后其比活为120U/mg. 相似文献
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