玉米精细胞质膜特异糖蛋白胶体金免疫定位

用亲和层析,SDS-PAGE及印迹技术,从玉米精细胞中分离纯化质膜蛋白。用ConA-HRP检测获得分子量为37和39kD两种糖蛋白特异成分。用它们分别免疫小鼠得到多克隆抗体,以兔抗鼠IgG胶体金(15nm)为探针,检查此两种蛋白在精细胞质膜上的分布。免疫定位表明,37kD, 39kD多肽是玉米精细胞质膜所特异的。有关此多肽的功能有待进一步研究。     

照光对兰州百合花粉萌发和花粉管生长的影响

初步研究了光对兰州百合花粉体外萌发及花粉管生长的影响，发现预先照光３０分钟促进花粉萌发也促进花粉管的生长，激活酸性磷酸酯酶１，同时还发现无论是预先照光还是水合都引起花粉过氧化物酶活性的上降。花粉中酸性磷酸酯酶１的出现与花粉萌发时花粉管的出现直接关联。     

混合型高脂血症患者脂蛋白脂酶基因S447X的多态性

目的:研究中国人混合型高脂血症患者脂蛋白脂酶基因多态性.方法:应用聚合酶链反应(PCR)扩增114例混合型高脂血症患者LPL基因外显子9片段,采用低离子浓度-单链DNA构象多态性方法(LIS-SSCP),结合RFLP技术,进行筛查.结果:检测到S447X多态性.114例患者中,野生型100例,突变体杂合子12例,纯合子2例.结论:中国人中存在S447X多态性,在所研究的混合型高脂血症患者中,与脂质水平无关联.     

钙对花粉萌发的启动产效应和对花粉管生长的调节作用

本文以云南松和烟草为材料，研究了钙对花粉萌发和花粉管生长的效应。结果表明花粉萌发介质中高浓度的钙（１０￣（－１）～１０￣（－１）２ｍｏｌ／Ｌ）显著抑制了云南松和烟草的花粉萌发和花粉管生长，而较低浓度的钙或缺钙（１０￣（－３）～０ｍｏｌ／Ｌ）对花粉萌发和花粉管生长无明显影响。测定萌发过程中花粉钙含量变化的结果表明，花粉水合阶段和萌发早期有一急剧的钙释放高峰。在培养介质中加入钙螫合剂ＥＧＴＡ抑制了花粉的萌发，但这种抑制可被随后加入的钙所逆转。钙通道阻塞剂Ｖｅｒａ－ｐａｍｉｌ和Ｃｏ￣（２＋）也能抑制或阻止花粉萌发，但这种抑制主要发生在花粉萌发的早期。此外，在同样浓度的钙载离子体Ａ＿（２３１８７）的处理下，花粉管生长比花粉萌发过程更为敏感。上述结果暗示着钙可能作为花粉萌发的启动者（Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）和花粉管生长的调节者（Ｒｅｇｕｌａｔｏｒ）来启动花粉萌发和调节花粉管生长。     

钙对花粉萌发的启动效应和对花粉管生长的调节作用

本文以云南松和烟草为材料，研究了钙对花粉萌发和花粉管生长的效应。结果表明花粉萌发介质中高浓度的钙（１０＾－１０＾－２ｍｏｌ／Ｌ）显著抑制了云南松和烟草的花粉萌发和花粉管生长，而较低浓度的钙或缺钙（１０＾－３－０ｍｏｌ／Ｌ）对花粉萌发和花粉管生长无明显影响。测定萌发过程中花粉钙含量变化的结果表明，花粉水合阶段和萌发早期有一急剧的钙释放高峰。在培养介质中加入钙螯合剂ＥＧＴＡ抑制了花煌萌发，但这种抑制可     

从三核型玉米花粉中大量分离制备生活精细胞

近年来植物受精生物学的研究有了很大的进展.数种植物花粉精细胞和卵细胞的少量分离已获成功,在体外已完成了精卵细胞的电融合.动物受精过程的深入研究揭示精细胞及卵细胞表面有着起识别作用的特异膜蛋白.植物受精过程中雌雄生殖细胞间的识别尚无定论,Blomstedt等用生物素标记的方法比较了百     

交叉酶切联合MALDI-TOF/MS分析重组蛋白二硫键分布的方法建立

 以Kringle环为分子模型,应用MALDI-TOF/MS联合特异性蛋白酶酶切技术,探讨建立蛋白质二硫键分布和定位分析的研究方法。采用pET22b(+)原核表达体系诱导表达重组人纤溶酶原K5蛋白（rhK5）,经Ni²⁺-NTA resin亲和层析纯化,并通过SDS PAGE和Western blot进行初步鉴定;采用MTT法分析rhK5对微血管内皮细胞的抑制活性;联合应用交叉酶切（Trypsin Gold单切或Trypsin Gold及Endoproteinase ASP N双酶切）和基质辅助激光解析-飞行时间质谱（MALDI TOF/MS）分析rhK5的二硫键分布;并应用生物信息学方法和圆二色谱法进一步验证rhK5二级结构。应用原核体系高效表达具有生物活性的rhK5蛋白,经交叉酶切联合MALDI-TOF/MS证实rhK5中的6个半胱氨酸正确配对形成了3对二硫键（Cys462:541, Cys483:524和Cys512:536）,圆二色谱法测定发现rhK5为典型的β折叠型结构。上述研究结果为分析基因工程重组蛋白质中半胱氨酸配对及二硫键分布提供了方法学基础。