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该文对快速一步法与乙醇固定法制备流式细胞周期样品进行系统比较,并对快速制备方法进行优化。用碘化丙啶快速染色法制备细胞周期样品,平行比较该方法与乙醇固定方法制备样本的测试结果,评估快速样本制备方法的可靠性和样品放置时间对实验结果的影响。实验结果表明,快速染色法与乙醇固定法相比,细胞周期各时相细胞比例及CV值在统计学上均无显著差异,样品放置6天细胞周期各时相百分含量无显著差异,但CV值和荧光强度有明显改变,在快速染液中添加2%～4%血清,能够有效降低细胞粘度、提高高粘度样本的检测速度。 相似文献
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Nanog是最新发现的一个在胚胎干细胞(ES细胞)中特异表达, 并在保持ES细胞多能性的机制中有重要作用的转录因子. Nanog基因的表达能非常灵敏地随ES细胞的分化而下调, 使之成为指示ES细胞多能性最理想的标志基因之一. 本研究基于细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, BAC)同源重组技术, 并改进了将报告基因敲入目的位点的重组方案, 高效构建了小鼠ES细胞(mES细胞)的Nanog/EGFP报告体系. 基因打靶后的mES细胞具有与其源mES细胞相同的特性, 并能稳定地将Nanog与EGFP (enhanced green fluorescence protein)的表达偶联. 此报告体系能通过EGFP的表达有效报告Nanog基因的表达水平, 从而对mES细胞分化或未分化状态作出明显指示. 本研究为mES细胞自我更新和分化的研究提供了一个理想的实验体系, 不仅能用于进一步优化mES细胞的培养体系, 对研究Nanog的表达调控及其与其他维持mES细胞多能性的因子和途径之间的关系也有深远的意义. 相似文献
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