棉花纤维发育和体细胞胚发生过程中实时定量PCR内对照基因的筛选

实时定量PCR技术(qRT-PCR)能够快速地对多个样品进行基因表达分析, 因此已成为芯片和微点阵数据验证的常用手段. 为了得到更精确的数据, 通常需要一个和多个内对照基因来平衡化qRT- PCR数据. 目前一般选择持家基因(housekeeping gene)作为内对照, 但很多持家基因的表达水平随着环境的改变而改变. 在棉花纤维发育和体细胞胚发生机制研究过程中已经产生大量芯片和微点阵数据, 但目前在采用实时定量PCR验证这些数据时都只用了一个持家基因来平衡化数据. 为了验证其可靠性, 本研究根据常用的持家基因(18S rRNA, Histone3, UBQ7, Actin, Cyclophilin, Gbpolyubiquitin-1和Gbpolyubiquitin-2)设计了7对引物, 用相对的绝对定量法验证了在棉花不同组织和不同发育阶段(21个样品)表达水平的稳定性, 发现在纤维发育的后期(17 DPA (day post anthesis)以后), 这些基因的表达都下调, 而纤维发育后期特异表达基因AGP的表达从15 DPA开始到27 DPA一直都呈上升趋势. 因此对于纤维系列特别是纤维发育后期基因的qRT-PCR更好的选择是相对的绝对定量. 而对于非纤维系列, 这些持家基因的表达水平相对纤维系列变化幅度较小, 但为了得到更精确的表达数据, 应该同时用Histone3, UBQ7和Gbpolyubiquitin-1一起来平衡化qRT-PCR数据.     

RDW和CK-MB指标在冠心病患者中的应用价值

观察红细胞分布宽度(RDW)与肌酸激酶同工酶(CK-MB)在冠心病患者临床诊治中的应用价值。选取2014年6月~2015年3月收治的冠心病患者120例作为观察组,根据其临床分型分为心绞痛AP组与急性心肌梗死AMI组,另选同期来院体检的正常健康者120例作为对照组,对比观察各组RDW与CK-MB指标水平。观察组RDW、CKMB指标水平明显高于对照组,且病情较重的AMI组RDW、CK-MB水平明显高于AP组,以上差异均具有统计学意义(P0.05)。冠心病患者RDW、CK-MB指标水平明显超过健康者,且病情严重者该两项指标水平较高,故可以认为RDW、CK-MB指标水平可以为冠心病诊断及病情发展提供参考依据,对冠心病的临床诊治具有重要的价值。