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对24个已鉴定的赖型致病钩端螺旋体特异消减片段进行DNA序列测定和生物信息学分析.结果显示,片段两端皆含有AluⅠ酶切位点,片段大小为149～1506bp,平均480bp,GC含量平均为36 63%.其中6个序列无任何同源匹配序列,提示可能来自新基因;18个同源序列可分为两类:与外膜蛋白或假想蛋白相关,与生化代谢修饰相关的酶.在Genbank中登记其中20个序列,序列号分别为AF300873-AF300877,AF325807-AF325821.这些基于生物信息学的功能预测,将有助于在此基础上进行相关的基因克隆鉴定、表达分析及功能验证. 相似文献
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研究卡介苗胞壁脂聚糖提取物对小鼠巨噬细胞株Ana-1的影响.采用超声波破碎细菌、Triton X-114相分离和酒精沉淀等方法分离得到卡介苗胞壁总脂聚糖的提取物;采用苯酚-硫酸法检测提取物中多糖含量,用不同浓度梯度的提取物刺激后,采用XTT法检测24h后Ana-1细胞增殖的情况,选择40×10-6g/mL胞壁脂聚糖刺激细胞48h,72h后,用流式细胞仪检测Ana-1细胞凋亡的结果.卡介苗胞壁脂聚糖提取物对Ana-1细胞的增殖活力有促进作用,而继续作用后诱导了细胞凋亡.卡介苗胞壁脂聚糖促进了鼠巨噬细胞的增殖,可能引起巨噬细胞的细胞因子的分泌而诱导了细胞凋亡,有较强的免疫活性. 相似文献
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分别以问号状赖型钩体017株,56601株及双曲钩体PatocI株基因组为模板,PCR扩增目的基因lag42与质粒pET32a(＋)构建重组原核表达质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达.结果显示不同毒力赖型钩体均能扩增出约1100 bp的片段,而PatocI株则未能扩增出目的片段;不同赖型钩体的lag42基因的同源性很高.融合表达质粒pET-lag42转化大肠杆菌BL21后,经IPTG诱导,表达出约62kDa的重组融合蛋白,用Western blotting证实其有良好的抗原性,纯化蛋白免疫新西兰大白兔,获 相似文献
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