吖啶橙-SDS-核酸荧光体系的研究及分析应用

在pH=5．89的六次甲基四胺-HCl缓冲溶液中，DNA可使吖啶橙(AO)的荧光强度增强，在一定浓度范固内，体系的荧光强度变化与DNA浓度呈线性关系，可用于DNA的定量测定。体系的荧光强度在加入阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)后有很大增强。研究了pH值及缓冲溶液种类、吖啶橙用量、表面活性剂种类及用量等对体系荧光强度的影响。结果表明，在最佳实验条件下，DNA浓度的线性范围分别为0～2．0μg/mL、2．0～10．0μg/mL，检出限为7．18ng/mL，相对标准偏差为2．0%。该方法线性范围较宽、灵敏度高、反应速度快、稳定时间长，是用染料定量分析DNA的一种无毒、高效、简便的新方法。     

测定蛋白质的四溴荧光素分光光度法

在pH=2.0的Britton-Robinson(B-R)缓冲液中,牛血清白蛋白(BSA)与四溴荧光素(TBF)形成复合物,在波长540 nm处有最大吸收,比四溴荧光素本身的最大吸收红移25nm。对不同pH值及离子强度对其结合作用的影响进行了探讨,并研究了各种实验条件对反应体系的影响,确定了最佳反应条件,制订出BSA测定标准曲线。在四溴荧光素浓度为1×10-5mol.L-1时,其线性范围为0.05~12 mg.L-1,检出限为23μg.L-1(S/N=3),方法稳定性好,检测灵敏度高。该方法用于实际样品的测定,结果令人满意。