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通过生物信息学分析2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2,S.suis2)中国强毒株05ZYH33的基凶组,预测并发现猪链球菌血清浑浊因子(Opacityfactor of S.suis,OFS)的编码基因ofs.为了构建ofsN-末端片段ofs^37-683的基因敲除株,首先构建中间为壮观霉素抗性基因,两侧为ofs^37-683上、下游同源序列的基因敲除质粒,并对该质粒进行PCR和酶切鉴定.根据同源重组的原理,通过电转化方法筛选得到ofs^37-683基因敲除株.PCR、测序和RT—PCR分析结果均显示ofs^37-683已完全被壮观霉素抗性基因替代,证实ofs^37-683基因敲除株构建成功.该敲除株的获得为进一步研究ofs在猪链球菌2型致病机制中的作用奠定基础. 相似文献
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