响应面法优化壳聚糖固定果胶酸裂解酶的研究

果胶酸裂解酶(PL,EC:4.2.2.2)广泛应用于果蔬汁澄清、纸浆漂白、苎麻脱胶等领域。本文以壳聚糖为载体,对多粘类芽孢杆菌来源的重组果胶酸裂解酶PpPel10a的固定化进行了探索。首先利用单因子试验考察壳聚糖浓度、戊二醛浓度、游离酶添加量、吸附时间和吸附温度对壳聚糖交联固定PpPel10a的影响,并通过响应面法进一步优化。结果表明当壳聚糖浓度3.5%,戊二醛浓度3%,游离酶添加量8 mg/g,吸附时间5 h,吸附温度30℃时酶活回收率最高,达到87.3%。与游离的PpPel10a相比,固定化PpPel10a对pH和高温均呈现出更好的耐受性。重复使用7次后,固定化PpPel10a的酶活力仍能保留30%以上。此外,利用固定化PpPel10a处理苎麻纤维,通过电子显微镜扫描发现,与对照相比酶处理获得的纤维表面更加平滑且纤维分散度较高。这说明固定化的PpPel10a在苎麻纤维脱胶中具有一定的应用潜力。