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用PCR扩增嗜高温菌Pyrococctu furiosus的小分子热休克蛋白基因后,克隆于质粒pT7473中.该小分子热休克蛋白Pfu-sHSP含有较多的稀有密码子,在大肠杆菌BL21(DE),几乎无表达,而在带有大肠杆菌稀有密码子AGA(arg)AGG(arg),AUA(ile)和CUA(leu)的BL21-Codonplus(DE)3-RIL中能大量表迭.大量表达Pfu-sHSP蛋白的细胞用超声波破碎后,离心沉淀用85℃水浴20 min,再离心,上清液再以Q Sepha-rose Fast Flow阴离子交换和S-200凝胶过滤层析进一步纯化,可以得到90%以上的蛋白. 相似文献
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用PCR扩增嗜高温菌Pyrococcus furiosus的小分子热休克蛋白基因后，克隆于质粒p17473中．该小分子热休克蛋白Pfu－sHSP含有较多的稀有密码子，在大肠杆菌BL21（DE），几乎无表达，而在带有大肠杆菌稀有密码子AGA（arg）AGG（arg），AUA（ile）和CUA（1eu）的BL21--Codonplus（BE）3－RIL中能大量表达．大量表达Pfu-sHSP蛋白的细胞用超声波破碎后，离心沉淀用85℃水浴20min，再离心，上清液再以Q Sepha—rose Fast Flow阴离子交换和S-200凝胶过滤层析进一步纯化，可以得到90％以上的蛋白． 相似文献
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