人体c-Mpl分子配体不同表达载体的构建及其优化表达策略

利用酵母双杂交系统从人体肝脏cDNA文库筛选到血小板生成素受体Mpl分子配体的xpl基因，构建pET-28(b)—xp1，pBV220-xp1和pBAD／gⅢA—xp1表达质粒，分别进行IPTG、温度和果糖诱导，表达产物利用小鼠巨核细胞集落形成单位测定活性。表达分析显示BL21／pET-28(b)—xp1水溶性XPl目的蛋白表达量为最高，活性最大；BL21／pBV220-xp1被短时、低温诱导后可增加表达目的蛋白的水溶性，但稳定性差，表达量和活性均不及BL21／pET-28(b)—xp1高；TOP10／pBAD／gⅢA—xp1不能分泌到细胞质周膜，以包涵体形式存在细胞内中，并且为无活性表达。