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双突变的胰岛素原基因在E.coli温度诱导表达体系中直接高密度发酵表达,表达产物形成的包含体经变复性处理及Sephadex G50纯化后,再由胰酶及羧肽酶B联合酶切,FPLC Mono Q纯化,最终得到B链羧端去三肽胰岛素(B28-B30)(DTRI)和去四肽(B27-B30)(DTI)胰岛素的纯品。应用悬滴气相扩散法在含丙酮的柠檬酸钠缓冲体系中培养出可供X射线衍射用DTRI单晶,空间群为P212 相似文献
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