用PCR法检测苏云金杆菌的溶原性噬菌体

根据苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,B.t)溶原性噬菌体G IL01(GenBank Accession Number:AJ536703)的同源序列设计一对引物,用35株B.t标准菌株和生产菌株MZ1(血清型H3 a3b)的过夜培养物作模板,结果有16株菌株包括MZ1能扩增出大小约为750 bp的预期产物,推测这16株菌为溶原菌。MZ1菌株的过夜培养液与指示菌ZK1(血清型H25)混匀并在双层琼脂上培养12 h后出现了滴度为2×107pfu的噬菌斑,从而证明生产菌株MZ1确为溶原菌;又以G IL01同源性较高的其它四个基因设计引物,分别以MZ1的培养物及其溶原性噬菌体基因组为模板进行PCR扩增,结果两者得到几乎一致的带型,进一步证明了生产菌株MZ1为溶原菌,说明利用PCR法检测鉴定苏云金杆菌的溶原性是可行的。比较指示菌方法、直接电镜法和DNA鉴定法,PCR法快速简便,对B.t生产上快速检测其溶原性噬菌体有实用意义。     

海洋病原细菌Enterobacter sp. EM28-2P -存在氯霉素磷酸化灭活机制

报道1例非氯霉素产生菌中发现的氯霉素磷酸化灭活机制.海洋病原细菌Enterobacter sp. EM28-2P -(Cm r,cat -,MIC=25 μg/mL)接种在含25 μg/mL标准品D-(-)-氯霉素LB培养基中培养24 h后,可生成磷酸化氯霉素.LC-MS分析检测出新生成3个离子峰m/z 400.9,402.8和404.9,都是典型[M PO 3 -H] -的特征指纹峰,对应于氯霉素的C3位羟基磷酸化产物.     

β葡萄糖苷酶的转糖基作用主产物及其对纤维素酶合成的？…

以纤维二糖特异诱导培养里氏木霉和黑曲霉菌丝,制备含有细胞外,细胞内和细胞质膜结合态β－葡萄苷酶的无细胞抽提物,采用色谱持谱联用分析,比较研究他们对纤维二糖的转糖基作用,结果表明两菌株中都只有细菌质膜结合态β－葡萄糖苷酶表现出显著的转糖基活性,     

海洋病原细菌Enterobacter sp. EM28-2共存氯霉素乙酰化和磷酸化灭活机制

报道1例氯霉素耐药性病原菌中共存乙酰化和磷酸化灭活机制。海洋病原菌Enterobactersp.EM28-2(Cmr,M IC=128μg/mL)接种在含25μg/mL标准品D-(-)-氯霉素LB培养基中培养24h后,可同时生成乙酰化和磷酸化氯霉素。LC-MS分析检测出新生成3类指纹峰:①[M C2H2O-H]-(m/z 363.0,364.9),对应氯霉素C1位羟基的乙酰化产物;②[M PO3-H]-(m/z 398.9,400.9,402.9),对应氯霉素C3位羟基的磷酸化产物;③[M C4H4O2-H]-(m/z 408.7,410.7),对应氯霉素C1位和C3位羟基的乙酰化产物。     

一株海洋真菌Trichoderma sp.Q98合成产物分析

海洋真菌Trichoderma sp.Q98菌株有4个新颖特征:菌丝产生天然红色素;菌丝产生饱和脂肪酸(1.44% 14:0;17.52% 16:0)及不饱和脂肪酸(2.9% 16:1 (△9),39.16% 18:2 (△8,11),37.12% 18:3 (△9,12,15));培养液含有2组多肽类物质(毛细管电泳迁移时间分别为5.2 min和10.6 min);培养液原液对多重耐药性菌株EN(3)23(Ap r, Cm r, Sm r, Tet r, Ery r)具有强烈抑制作用.     

纤维二糖诱导阻遏真菌合成纤维素酶的特异性基础

定量比较研究黑曲霉 (Aspergillusniger)AMS11和里氏木霉 (Trichodermareesei)QM94 14细胞内、细胞外及细胞质膜结合态 β 葡萄糖苷酶 (βGLase ,EC 3 2 1 2 1)同工酶对 17 5mmol/LD ( ) 纤维二糖 ([α]2 0n 35°) 转化作用 ,旨在揭示多亚细胞定位 βGLase功能差异及物种特异性基础 .结果发现两菌株中胞内和胞外 βGLase都只能水解之产生葡萄糖 ,而质膜结合态βGLase则按一定比例同时将其水解生成葡萄糖和转糖基生成龙胆二糖 ,且菌株AMS11的转化能力都比QM94 14的强 .观察到“葡萄糖亏损”现象 ,暗示该转化过程存在基于葡萄糖耗损的代谢过程偶联 .提出由多亚细胞定位的 βGLase同工酶介导诱导物形成与转化的“亚调控网络”模型 ,解释同一浓度纤维二糖对不同物种具有诱导或阻遏效应差异的生理学基础 .     

Major Transglycosylation Productsof β-Glucosidase and Their Induction Effects on Cellulase Biosynthesis

以纤维二糖特异诱导培养里氏木霉和黑曲霉菌丝,制备含有细胞外、细胞内和细胞质膜结合态β葡萄糖苷酶的无细胞抽提物,采用色谱持谱联用分析,比较研究他们对纤维二糖的转糖基作用,结果表明两菌株中都只有细胞质膜结合态β葡萄糖苷酶表现出显著的转糖基活性,可检测到的含有β糖苷键葡二糖类的主要转糖基产物是β龙胆二糖而不是槐糖．当在里氏木霉和黑曲霉菌丝的洗脱置换培养体系中加入β龙胆二糖时,可以诱导纤维素酶合成,但它比槐糖（迄今最有潜力的诱导物）的诱导效率低．这些结果支持假说认为是质膜结合态β葡萄糖苷酶从纤维素寡聚物形成转糖基作用产物,作为纤维素酶合成的诱导物     

海洋病原细菌Pseudomonas sp.ER22对氯霉素中间体的手性转化

海洋病原细菌PSEUDOM ONAS SP.ER22(CMR,M IC=64ΜG/ML)接种在含有25ΜG/ML标准品氯霉素中间体(D-(-)-苏-2-氨基-1-对硝基苯基-1,3-丙二醇)LB培养基中培养24 H后,可检测到由(1R,2R)形式转化生成(1S,2S)对映体。LC-MS/MS分析显示互为对映体的特征指纹峰相同(M/Z213),保留时间分别为3.74 M IN和4.98 M IN。