山葡萄多酚对辐射小鼠红细胞免疫功能的影响

目的 研究山葡萄多酚对60Co γ辐射小鼠红细胞免疫功能及脂质过氧化的影响.方法 应用药理学方法 及化学试剂盒进行测定.结果 山葡萄多酚可提高受照小鼠红细胞C3b受体花环率(RBC-C3bRR),红细胞免疫复合物花环率(RBC-ICRR),改善红细胞表面唾液酸含量,提高血清SOD活性,降低血清MDA含量.400,800 mg/kg剂量山葡萄多酚效果显著(P<0.05).结论 山葡萄多酚可以改善受照小鼠红细胞免疫功能及脂质过氧化作用.     

重组小鼠14-3-3蛋白theta亚型的构建

目的 克隆编码14-3-3蛋白质θ亚型的cDNA,制备该蛋白质的基因重组蛋白质.方法 参照小鼠14-3-3蛋白质θ亚型mRNA结构设计引物,以小鼠脑总RNA为模板,RT-PCR法克隆编码14-3-3蛋白质θ亚型的cDNA,插入原核表达质粒pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL21(DE3)使其表达谷胱甘肽S转移酶(GST)为标签的融合蛋白质,以凝血酶定点分解融合蛋白并采用Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化目的 蛋白.结果 RT-PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳分离可见约800 bp条带,序列分析表明重组质粒pGEX-1433theta中的插入子为738 bp,编码245个氨基酸,其核苷酸及氨基酸序列与Pubmed NM-011739展示的结果一致.重组质粒pGEX-1433theta在BL21(DE3)中的表达量随IPTG诱导时间递增,融合蛋白质为可溶性组分.亲和层析纯化的14-3-3theta在SDS-PAGE上表现为单一条带,表观相对分子质量为30 ku.每L培养菌液可收获4mg基因重组型小鼠14-3-3theta.结论 克隆了编码小鼠14-3-3蛋白质θ亚型的cDNA,制备了高纯度基因重组型小鼠14-3-3theta,为进行单克隆抗体的制备奠定了坚实的基础.