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PPAR γ配体结合域的表达、纯化和鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
提取MCF-7乳腺癌细胞的总RNA,通过RT-PCR技术扩增出hPPAR γ/LBD cDNA,并克隆于载体pGEX-1γ上,测序表明该序列与已报道序列相同,将其转入BL21(DE3)大肠杆菌中,IPTG诱导表达GST-hPPAR γ/LBD,在不同培养温度或IPTG诱导浓度下,GST-hPPAR γ/LBD以可溶或包涵体形式存在,表达产物经谷胱甘肽Sepharose 4B亲和层析纯化,可被抗hPPARγ多克隆抗体特异识别,并与其天然配体发生特异性结合. 相似文献
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用低强度脉冲电磁场对家猪精子细胞进行电击处理,发现台盼蓝染料能够进入细胞,而且通过扫描电镜可以观察到细胞膜表面有明显的孔洞。这证实了低强度瞬态电磁场能够引起猪精子细胞电穿孔和促使外源物质进入细胞内。 相似文献
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提取MCF-7乳腺癌细胞的总RNA,通过RT-PCR技术扩增出hPPARγ/LBD cDNA,并克隆于载体pGEX-1γT上,测序表明该序列与己报道序列相同,将其转入BL21(DE3)大肠杆菌中,IPTG诱导表达GST-hPPARγ/LBD,在不同培养温度或IPTG诱导浓度下,GST-hPPARγ/LBD以可溶或包涵体形式存在,表达产物经谷胱甘肽Sepharose 4B亲和层析纯化,可被抗hPPARγ多克隆抗体特异识别,并与其天然配体发生特性异结合。 相似文献
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