产碱杆菌DN25纯化降氰酶稳定剂的选择

向产碱杆菌（Alcaligenes sp.）DN25的纯化降氰酶中分别添加不同浓度的多元醇类、金属离子类、糖类、防腐剂类等添加剂,研究不同种类、不同浓度的添加剂对降氰酶稳定性的影响,优选可以提高降氰酶稳定性的添加剂.结果表明：外加添加剂甘油浓度为1.5％（m/V）时,酶活保留率为5.4％;[NH4]2SO4浓度为4％（m/V）时,酶活保留率为5％;淀粉浓度为6％（m/V）时,酶活保留率为14.3％;甘氨酸浓度为3％（m/V）时,活力酶活保留率为19.6％.甘氨酸对产碱杆菌DN25降氰酶具有最强的保护作用.     

产碱杆菌DN25降氰酶产酶条件初步优化

以实验室保藏的一株具有高效降氰活性的菌株Alcaligenes sp. DN25为研究对象,通过分析其降解产物,发现终产物中存在甲酸,初步判断此菌株降氰反应为氰水解途径。在培养基中添加KCN来考察底物对菌体产酶的诱导作用,结果发现菌体的活力没有提高,表明菌株DN25所产降氰酶应为组成型酶。在培养基中添加4种金属离子和4种含硫物质,其中微量金属离子对菌体的生长和活性均有抑制;Na2SO4和Na2S2O3对菌体生长和产酶均无明显影响;DL-半胱氨酸对菌体产酶有明显促进作用,DL-甲硫氨酸可同时提高菌体的生长量和产酶水平,从而提高发酵液比活力。研究结果为降氰酶的大量获得以及酶制剂在氰污染治理方面的应用研究奠定了基础。