风味蛋白酶水解牦牛血液蛋白工艺优化研究

通过风味蛋白酶水解牦牛血液蛋白,以蛋白水解率为指标,采用单因素实验探究水解pH、水解温度、料液比、酶浓度、水解时间五个因素对牦牛血液蛋白水解效果的影响.在此基础上以五因素三水平正交试验(L18 (37))优化水解工艺,发现较佳水解工艺参数为A1B2C3D3E3,即最适pH为6.0、最适温度为50℃、料液比为1∶9.0g...     

幼兔和成年兔感染兔出血热病毒后血清中IL-8、IL-10、TNF-α、TGF-β和MCP-1检测分析

兔出血症病毒(RHDV)是兔出血症的病原体,可导致成年兔大量死亡.研究表明,细胞因子在RHD致病中发挥了重要作用.为探索细胞因子在RHDV对幼兔和成年兔致病差异性中的作用机制,通过对幼兔(2周龄)和成年兔(3月龄)肌肉注射检测为RHDV核酸阳性的病兔肝脏悬液,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测感染RHDV后不同时间(0、12、24、36、48、60 h)血清中IL-8、IL-10、TNF-α、TGF-β和MCP-1的水平.ELISA结果显示,成年兔感染RHDV后血清中IL-8、IL-10、TNF-α、TGF-β和MCP-1水平在0～36 h显著升高(P<0.05),并在感染后36～48 h死亡.幼兔感染后血清中IL-8水平在24～60 h明显上升(P<0.05),TNF-α和TGF-β水平变化无明显规律,IL-10和MCP-1水平无明显变化,且未出现死亡现象.比较幼兔和成年兔上述细胞因子水平发现,成年兔感染后血清中IL-8、IL-10、TGF-β和MCP-1水平显著高于幼兔(P<0.05),TNF-α水平在感染后24 h左右高于幼兔(P<0.001),其余时间均...     

小反刍兽疫疫苗研究进展

小反刍兽疫是小反刍兽疫病毒引起的一种急性病毒性传染病,是导致家养和野生小反刍动物死亡的罪魁祸首.继牛瘟病毒减毒活疫苗之后,小反刍兽疫病毒减毒活疫苗被广泛用于预防控制小反刍兽疫的流行,但该疫苗存在无法区分自然感染动物和接种动物以及热稳定性低等缺陷,导致小反刍兽疫仍在很多地区相继出现并造成重大经济损失,因此开发高效耐热的新...     

哺乳动物细胞高效表达系统研究进展

哺乳动物细胞高效表达系统是生物制药工业中十分关键的环节,而表达载体和宿主细胞又是哺乳动物细胞表达系统的两个重要组成部分.文章较详细综述了通过目的基因整合位点的优化、增加目的基因拷贝数、提高目的基因的转录和翻译水平等构建哺乳动物细胞高效表达载体的研究进展.同时,为使宿主细胞更好地适应工业化大规模培养要求,对通过抗凋亡、细胞周期调控、糖基化、细胞增殖控制技术和多基因代谢等细胞代谢工程对其进行改造的研究进展也作了介绍.     

哺乳动物细胞表达外源基因常用病毒载体的研究进展

文章概述了逆转录病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、慢病毒载体等四种常用哺乳动物细胞表达外源基因的病毒载体系统的来源、组成、特点及应用方面研究的进展.     

链球菌Fc结合蛋白G基因的克隆与原核表达

为研制SPG相关免疫试剂盒,设计了1对引物,从C群链球菌C40株基因组中扩增出了387 bp的细胞壁结合蛋白G(streptococcal protein G,SPG)基因,该基因编码125个氨基酸,包含了C1和C2两个Ig G结合结构域.构建了原核表达载体p ET28a(+)-SPG,IPTG诱导表达出分子质量约15.0 ku的SPG蛋白,并应用亲和层析柱纯化了SPG蛋白,Western blot分析表明纯化SPG蛋白具有生物学活性.