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鸡卵黄抗体的制备及其不均一性 总被引:6,自引:0,他引:6
介绍了免疫期卵黄液中白蛋白(牛)抗体效价和亲合力的变化。研究了PH对稀释卵黄液去脂效果,以及硫酸铵浓度对IgY浓缩、纯化效果的影响。探讨了抗白蛋白IgY的异质性。实验表明稀释卵黄液酸化处理和IgY盐析的最适合条件分别是PH5.1和2.2mol/L。经免疫亲和柱层析或金属螯合亲和柱层析后,白蛋白抗体样品均出现多个不同层析行为的抗体峰。实验提示免疫卵黄液中不仅可能存在不同亲合力、特异性的白蛋白抗体,还 相似文献
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介绍一种新的酶结合物的制备方法,研究了该结合物在酶联免疫吸附测定中的初步应用。通过2-亚氨硫杂戊烷的修饰反应,在葡萄糖脱氢酶、抗体(IgG)分子上分别引入新的游离巯基。巯基化的葡萄糖脱氢酶和免疫球蛋白G之间,通过双功能试剂二马来酰亚胺甲醚(进行)偶联,偶联产物由Sephacryl S-300柱层析纯化。按非竞争性固相双抗体夹心法,将精制的IgG-葡萄糖脱氢酶(A)结合物用于人白蛋白(Ⅰ),人甲胎蛋白(Ⅱ)和牛胰岛素(Ⅲ)的定量检测。在0~10 ng/mL范围内,Ⅰ和Ⅱ与A活性均呈良好的线性相关;但Ⅲ与A活性之间没有任何相应关系。 相似文献
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通过PCR方法得到去除C端201个氨基酸残基(胞浆区,跨膜区和Ser/Thr丰富区)的Kex2p的DNA片段,并将该片段装载到质粒pPICZ-C中构建成表达质粒pPICZ-C-KEX2ΔCP。经过大肠杆菌(DH5α)的扩增,表达质粒被转入甲醇酵母(GS115)中,并得以分泌表达。发酵上清液中存在切割肽链中双碱性氨基酸C端的酶活力,SDS-PAGE电泳的结果证实了Kex2p的分泌表达,以及Kex2p在溶液中的自降解。 相似文献
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将含有谷胱甘肽转硫酶 ( GST)基因的 p GEX质粒转入大肠杆菌 TG1后 ,在 0 .5 mmol/L异丙基硫代 - β- D-半乳糖苷 ( IPTG)诱导培养下表达了 GST,用亲和纯化得到的 GST免疫新西兰大白兔 ,获得了滴度 ( ELISA)在 2× 1 0 5以上的抗血清 ,纯化后的抗体已成功地应用于两种新的融合蛋白 GST- FLP和 GST- Pre S1的免疫印迹检测和亲和层析法纯化 相似文献
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酪蛋白磷酸肽的制备及性质 总被引:6,自引:0,他引:6
用不同的蛋白水解酶水解牛乳酪蛋白,通过钙-乙醇沉淀法和离子交换法从水解产物中提取酪蛋白磷酸肽(CPPs),并对CPPs进行体外化学分析及体内生物学功能鉴定,结果表明:用双酶法(胰蛋白酶和Alcalase)制得的CPPs3(平均相对分子质量为4 066,摩尔N/P为5.48)在体外的持钙能力最强,连续喂食该样品的小鼠对钙的吸收明显提高(吸收率达56% )。 相似文献
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