白豆α-淀粉酶抑制剂糖蛋白的提纯及性质研究

目的从白豆中分离纯化得到α-淀粉酶抑制剂(α-AI),研究其抑制动力学特征及化学稳定性,为其作为降糖减肥药物的开发提供技术资料。方法采用乙醇分级沉淀、CMII纤维素离子交换柱层析及凝胶柱层析,从白豆中分离纯化得到白豆α-AI;通过在不同底物及抑制剂浓度下的酶反应速度,研究其抑制动力学特征;通过在不同温度及pH条件下的抑制活性,研究其对温度及pH的稳定性。结果纯化得到一相对分子质量为36 ku的α-AI糖蛋白;其对α-淀粉酶的抑制类型为非竞争性抑制,ID50=1.7×10-5mol/L,抑制常数Ki=9.412 5×10-6mol/L;白豆α-AI在pH 3.0~10.0,温度70°C活性稳定。结论从白豆中分离得到的α-淀粉酶抑制剂糖蛋白对猪胰α-淀粉酶具有较高的抑制活性,对温度及pH具有较高的稳定性,其作为一种安全、天然降糖药物具有良好的开发前景。