《分子克隆实验指南》(第3版)

作者:J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔译者:黄培堂等出版单位:科学出版社出版日期:2002年8月定价:168元     

乙肝病毒基因上一个新的维甲素受体反应元件的发现

在对人乙肝病毒ＡＤＲ－１进行计算机序列检索时，发现在Ｂａｍ ＨＩ和ＨｉｎｃⅡ酶切位点内存在一保守的维甲素受体反应元件序列。用构建好的包含这一片段的乙肝病毒基因亚克隆ｐＢａｍＨＩ－ＨｉｎｃⅡ－ＣＡＴ２与人维甲素Ａ受体ｈＲＡＲα或人维甲素Ｘ受体ｈＲＸＲα共转染人特异性肝癌细胞ＨｅｐＧ２，通过相应配体ＡＴＲＡ或９－ｃｉｓＲＡ的刺激，使细胞内氯霉素乙酰基转移酶活力较不加配体刺激的对照细胞明显增强。为了排除     

大力开发基因药物

大力开发基因药物李载平（中科院上海生化所研究员）没有医药的现代化，工业和科技的现代化是不全面的。有时光一个药的年产值就超过宝钢一年的年产值，如象ＥＰＯ（促红细胞生成素）、ＧＣＳＦ（粒细胞集落刺激因子）等，其中每一个都能获得１０亿美元的产值，如果上海能...     

新型核酸相减杂交用载体及其杂交效率

核酸分子杂交广泛用于特定序列的核酸的检验、纯化,尤其用于基因或其表达产物的分离、纯化和在基因组上的定位等方面.从各种组织和细胞系中选择群特异的(分化表达的)核酸种类的杂交,即相减杂交,它在肿瘤分子生物学和抗癌基因的研究中是一种非常重要的研究工具.目前使用的相减杂交技术都是在液相进行两群DNA,或一群DNA与另一群RNA(其中含待分离的群特异DNA的称为靶[target],而用于除去同源序列的DNA和RNA称为推动剂[driver])的杂交,使具同源序列的核酸形成杂合双链.然后用不同方法除去双链核酸,在溶液中留下未杂交的单链核酸.这些方法包括:(1)羟基磷灰石柱层析,(2)用生物素标记的推动剂去与靶杂交,再向反应液中加入链霉菌生物素结合蛋白,然后用酚抽提.然而,这两种方法存在的缺点妨碍了它们的使用,或者效率不高(如(1)),或者试剂价格较昂贵,步骤较多(如(2)).对-β-硫酸酯乙砜基苯胺(SESA)是活性染料合成的中间体,国内已大量生产.我们曾经用它制备过对-重氮苯砜乙基纤维素纸(DBSE纸)共价固定核酸进行固相杂交,取得了满意的结果.因此我们考虑用SESA作偶联剂,把推动剂共价固定在易于分离的高分子载体上,再与靶杂交.我们制备了对-氨基苯砜乙基葡聚糖凝胶(ABSE-Sephadex,固相载体)和对-氨基苯砜乙基糖原(ABS