CW2M3分泌新型淀粉酶的最适条件及酶的应用条件

从原筛选的产酶菌株CW₂出发， 经多次紫外诱变、 初筛和复筛后， 获得了变异菌株CW₂M₃， 其产酶水平为原菌株的332.7％， 且具有良好的遗传稳定性. 薄层层析证明，CW₂M₃分泌的新型淀粉酶能有效地催化淀粉降解产生异麦芽低聚糖， 产物主要包括异麦芽糖、 潘糖、 异麦芽三糖等. 用正交法结合薄层层析法确定了各因素对CW₂M₃产酶水平的影响， 结果表明， 培养温度是显著因素，CW₂M₃的最适产酶条件为： 用牛肉膏培养基（牛肉膏0.7%、 蛋白胨0.7%、 NaCl 0.5%、 pH 7.0）培养， 温度40 ℃， 时间12　h. 用该酶催化淀粉转化为异麦芽低聚糖时， 酶促反应时间和温度均是显著影响因素， 酶催化淀粉降解的最适条件为: 温度65 ℃， 酶促反应1.0　h， 体系pH为7.0.     

一种快速建立同源导入近交系的方法——标记辅助选择法

实验动物模型是研究人类疾病的重要手段和工具。人类的许多疾病表现为数量性状,利用人类本身很难找到控制这些数量性状的遗传位点,鼠却能弥补这一不足。鼠以其繁殖性能好、生长快、世代间隔短,而且其基因组与人类具有较高的同源性等特点,使其逐渐成为研究控制人类疾病数量性状基因座（QTL）的模式动物。科学家们已经在小鼠中监测到酒精敏感、糖尿病、自身免疫、肥胖等疾病相关的数量性状位点。     

复合顶板条件下的大跨径大间排距预拉力锚网索支护实践

以新庄孜煤矿56204顺槽为例，系统地介绍了复合顶板条件下的大跨径、大间排距预拉力锚网索支护方案、煤层巷道围岩稳定性特征分析、支护思想，提出根据地质备件强化顶板，减缓两帮压力，加强高帮侧支护强度，加大初期支护投入是支护成功的有力保证。     

整合素连接激酶相关磷酸酶（ILKAP）抗体的制备及其特异性分析

以整合素连接激酶相关磷酸酶（ILKAP）全蛋白为抗原, 采用腿部肌肉注射和耳缘静脉注射相结合的方法对新西兰大白兔进行免疫, 共免疫6次, 最
终获得ILKAP抗血清. 采用Protein A agrose柱纯化抗体, 获得ILKAP的多克隆抗体. 免疫印迹分析表明, 所获得的ILKAP多克隆抗体具有较高的特异性, 间接ELISA方法测定ILKAP多克隆抗体的滴度为1 ∶1 600. 免疫荧光分析表明, 所获得的ILKAP多克隆抗体在细胞水平应用效果较好.     

多功能淀粉酶OPMA在枯草杆菌中的分泌表达及发酵条件优化

构建多功能淀粉酶OPMA-N和OPMA-G的分泌表达载体pMA5-OPMA-N和pMA5-OPMA-G, 应用枯草杆菌表达系统实现了多功能淀粉酶
OPMA-N与OPMA-G的表达与分泌, 并分别对其发酵工艺进行优化. 实验结果表明: OPMA-N适宜的表达与分泌条件为： 质量分数为1%的MgSO₄、 质量分数为0.3%的尿素和质量分数为0.5%的酵母粉为培养液, pH=6.5, 培养液装液量为16%, 37 ℃发酵培养48 h; OPMA-G的最适分泌表达条件为： 质量分数为1%的NaCl、 质量分数为1%的淀粉和质量分数为0.8%的酵母提取物为培养液, pH=7.0, 培养液装液量为32%, 37 ℃发酵培养36 h; 在上述条件下, OPMA-N和OPMA-G的分泌水平分别为发酵液中总蛋白的45%和58%, 分泌酶的比活力分别为每毫克4.57和4.65酶活力单位.     

一株高温菌所产酶的功能分析与菌株分类鉴定

从长白山温泉中分离出一株可产生淀粉降解酶的高温菌(CW₂), 用薄层层析法分析鉴定酶促淀粉降解的产物, 发现CW₂所产生的淀粉降解酶系胞外酶, 可催化淀粉降解产生异麦芽低聚糖(主要包括异麦芽糖、 异麦芽三糖和潘糖). 用PCR法扩增其16S rDNA, 测定其序列（873 bp）, 与GeneBank中已知菌的16S rDNA序列对 比, 该菌株与模式菌株Bacillus licheniformis ATCC 14580,Bacillus licheniformis  DSM 13,Bacillus subtilis strain JM4的16S rDNA序列同源性最高, 只分别相差9,9,13个碱基, 序列相似性分别为98.97％,98.97％,98.51％. 用Neighbor joining方法构建CW₂进化树, 并用Bootstraping法对其评估, 结果表明, CW₂与Bacillus licheniformis, Bacillus sonorensiss形成Bacillus属中的亲缘关系最近的一个进化种群.     

蛋白磷酸酶2C(PP2C)的表达、纯化与催化活性

从小鼠肌肉组织中提取了总RNA,经RT-PCR,扩增出蛋白磷酸酶2C(PP2C)基因,并构建了pUCm-T载体.经核酸序列分析证明PP2C基因序列正确后,将pUCm-T中的PP2C基因插入pET28a载体中,构建了表达载体pET28a-PP2C,并转化到E.coli BL21(DE3)进行表达.经测定,该菌株表达目的蛋白PP2C的最适条件为:诱导物IPTG的终浓度为0.8 mmol/L,37 ℃,诱导时间为20 h.在此条件下,PP2C实现了高效表达,表达的PP2C蛋白约占菌体总蛋白的18.2%,其中在裂解上清液、沉淀中分别占总蛋白的7.1%和11.1%.经SDS-PAGE分析,表达产物分子量约为42 000.应用Ni-NTA柱实现了可溶性PP2C的纯化,收率达80.5%,纯化的PP2C比活力达34.5 U/mg.     

浅析加强水利政工队伍建设与管理工作的要求及其重要性

伴随着经济社会的发展,人民的物质生活水平的提升,公民的政治道德素养也在不断的提高.法律意识、监督意识与权利意识不断的得到加强,包括水利工程建设在内的任何一项关乎社会公共利益关系的社会工作都必须足够的重视起政治工作的科学推进,积极主动适应社会发展的需求和要求,进而保障水利工程建设任务的顺利完成.切实加强水利工程的思想政治管理工作的完善,不仅能够有效的推动管理体制的发展以及管理效率的提升,并且也关系到水利工程整体事业的发展质量,将会在很大程度上影响到水利领域政治思想教育工作的推进.因此要不断的促进管理资源的优化合理配置,推动水利政工队伍管理工作的进步与发展.     

黑曲霉As 3.3883菌种的诱变及其发酵条件探索

本文报导了黑曲霉As 3.3883经诱变可得一高产果胶酶的变异株JB513.该变异株经液体发酵制取果胶酶的最适条件是:起始pH 4.0,接种量2×10~4个/mL,通气量为培养基占摇瓶体积的1/5,发酵温度为30℃,发酵时间84h.其时,发酵液的果胶酶活力达11.9μmol·min~(-1)/mL(小试250mL),及12.0μmol·min~(-1)/mL(中试500L).同时发现该发酵液具有纤维素酶的活性.