人αB干扰素基因在PGK1启动子和α因子前导序列控制下在酵母中的表达和分泌

借助化学合成的寡聚核苷酸接头将酵母PGK1启动子和α因子前导序列相连构建成一个αB干扰素基因的分泌表达载体YFD65.含质粒YFD65的酵母菌BJ1991能分泌表达αB干扰素,分泌到培养基中的αB干扰素的量为10~8U/L.     

一种PCR快速鉴定重组体DNA阳性克隆及插入方向的方法

当外源DNA以非定向的方式插入克隆载体时,需用测序或酶切的方法确定插入方向,上述两种方法或昂贵或费力。描述了一种快速、简便的PCR法,即利用载体的通用引物和目的片段的两个特异性引物直接扩增重组菌落,从而达到鉴别DNA插入方向的目的。     

靶标替换消减SELEX技术筛选小鼠IgG Fc片段的DNA配基及其活性鉴定

建立高特异性和亲和力的小鼠IgG Fc片段DNA配基筛选方法.采用几种小鼠IgG亚类(鼠抗HBV-IgG、小鼠IgG的Fc,IgG1,IgG2a)作为靶分子,利用靶标替换消减SELEX筛选方法进行16轮筛选.利用dot-blot,高压液相色谱以及凝胶阻滞(EMSA)方法对所得配基进行活性鉴定.经过16轮筛选,得到了与小...     

基于相似度的多类别不完整云计算网络的聚类填充算法设计

传统基于概率分布的不完整数据聚类填充算法,未综合分析数据对象的类别属性,数据填充效率和精度较低。因此,本文提出一种新的聚类填充算法,利用近邻传播(AP)算法聚类不完整数据,采用元祖相似度算法对不同类别的不完整数据实施填充。通过数据挖掘方法获取多类别不完整云计算网络系统中的加权关联规则,实施常规缺失数据的填充,采用数据推荐筛选方案实施元组相似度运算,完成异常缺失数据的填充,最终获取完整的云计算网络数据集,提高云计算网络数据的有效利用率。实验表明,本文设计的聚类填充算法具有较高的填充效率和精度。     

前列腺癌细胞乳鼠移植瘤动物模型的建立

为构建前列腺癌细胞(PC3)乳鼠移植瘤动物模型,在体外培养PC3细胞,经软琼脂克隆形成实验筛选PC3细胞株中具有克隆形成能力的细胞,常规传代后取对数生长期细胞,接种约2×107 mL-1单细胞悬液0.1mL于出生2d的乳鼠颈部和前肢交界处皮下,建立移植肿瘤动物模型,观察乳鼠肿瘤生长特点,并用病理组织HE染色和免疫组织化学染色鉴定PC3在乳鼠皮下的成瘤情况.结果显示注射后乳鼠未见明显的不良反应.1~6d可见乳鼠皮下肿胀,且能触及到黄豆粒大小的肿物;7~15d肿物变大,肉眼能观察到明显肿物;16~21d时肿物有消退迹象.病理组织HE染色观察显示肿块为肿瘤组织,免疫组织化学染色显示肿物中CD133呈强阳性表达.     

基于OBE理念的混合式教学模式探索与实践——以《基础生态学》课程为例

OBE理念与混合式教学模式在国内经过多年实践,已形成了完整的理论体系和实施模式,但如何将二者有机融合报道较少.基于OBE理念,将《基础生态学》课程教学内容划分为基础性问题和探索性问题,从课前、课中、课后、考核等4个环节针对上述两类问题采取不同教学策略,通过面向学生的问卷调查课程目标达成度.结果表明：基于OBE理念的线上线下混合教学模式,能够以学习成果的产出倒逼学生学习过程的改进,可为基础生态学的教学提供新的范式.     

云计算数据中心的安全体系架构设计

我国颁布的信息安全等级保护技术规范诞生的时间早于云计算技术的时间，因此，原有的安全体系架构并不能完全适用于云计算环境，本文深入分析传统信息安全和云计算环境信息安全的差异点并提出系统的解决思路，在此基础上设计云计算数据中心的安全体系架构，并与等级保护技术措施进行整合。     

创新思维能力培养的研究与实践

本文从当前教育形势入手，结合实际工作经验，分析和研究了如何在教学活动中激发学生的创新思维能力。     

用阴离子交换色谱法制备寡聚核苷酸

建立了用Source 15Q强阴离子交换柱分离纯化寡聚核苷酸的方法.在pH 9.0,以20 mmol/LTris-HCl缓冲液 2.0mol/L NaCl为流动相,线性浓度梯度洗脱,紫外检测波长为260 nm,流速为1 mL/min的分离条件下,能很好地分离18～78 mer的合成寡聚脱氧核苷酸和PCR的单双链产物,探讨了流速和盐浓度对分离的影响,并测得24mer OligoDNA的回收率为90%左右.该方法简便、快捷、分辨率高,可用于寡聚核苷酸、反义核酸药物的分离、纯化、鉴定和制备.     

环氧基化磁性微球的制备及表征

采用反相聚合包埋技术制备以Fe3O4为磁核,琼脂糖为壳层的琼脂糖磁性微球,用环氧氯丙烷对其进行表面化学修饰后制得环氧基化磁性微球.通过傅里叶变换红外光谱、热重分析和振动样品磁力测定等表征其结构和性质,采用酶联免疫吸附试验检测其对乙肝表面抗原的固定能力.结果表明,环氧基化磁性微球平均粒径为30.3μm,环氧基含量为140.19μmol·g-1,磁含量为50.53%,饱和磁化强度为11.25emu·g-1,对乙肝表面抗原的固定能力明显高于琼脂糖磁性微球,具有良好的单分散性、超顺磁性和生物兼容性,可作为筛选乙肝表面抗原特异性核酸适配体的载体.