用根癌农杆菌介导法建立抗真菌病害油菜育种体系的研究初报

用含β－１,３－葡聚糖酶和几丁质酶串联基因双价载体质粒ＰＢＬＧＣ的根癌农杆菌侵染甘蓝型油菜（Ｂｒａｓｉｃａｎａｐｕｓ）带柄子叶和下胚轴的方法,初步建立了抗真菌病害油菜高效基因转化育种体系．研究了不同种类和不同浓度的激素对带柄子叶和下胚轴不定芽诱导的影响,试验结果表明经卡那霉素（ｋａｎ）筛选,含６ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ的ＭＳ培养基中带柄子叶的出苗率及绿苗分化率最高,分别为１００％和２５％;下胚轴在含１ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ和０．１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的ＭＳ培养基中出芽率及绿苗分化率最高,分别为１００％和２３％．绿苗在含５０ｍｇ／Ｌｋａｎ的诱根培养基中培养后移栽于花盆,套袋自交,自交种子所得无菌苗的带下胚轴子叶再经含５０ｍｇ／Ｌｋａｎ的ＭＳ培养基筛选培养,结果小苗全部生根成活,初步证明目的基因已转入油菜植株中,经诱导不定芽阶段和生根阶段两次ｋａｎ筛选是有效的