细菌群体感应机制与动植物病原菌的致病力

N 酰基高丝氨酸内酯 (AHLs)作为信号分子介导的细菌群体感应机制参与许多生物学功能的调节 ,当侵染动植物寄主组织的病原菌繁殖到一定量时 ,细菌本身产生的AHLs积累到临界浓度 ,AHLs与胞内特异受体结合 ,启动致病因子的表达。利用AHLs降解酶和AHLs类似物的特性 ,干扰和破坏病原菌的AHLs 群体感应机制 ,将为利用现代生物技术防治此类细菌病害开辟了一条全新的途径     

利用重组大肠杆菌生产聚-3-羟基丁酸的研究

利用携带能合成聚-3-羟基丁酸的基因的大肠杆菌E. coli XL1-Blue,优化培养基和培养条件后,进行了补料分批培养.结果表明,重组大肠杆菌E. coli XL1-Blue(pKSS105)的最适培养基为R培养基.在最佳条件下,以葡萄糖为唯一碳源培养工程菌60h后,发酵液中菌体干重达183g/ L,P(3HB)的产量为133.8g/ L,P(3HB)含量为73.1%.实验结果为P(3HB)实际应用提供了可能性的基础.     

聚羟基烷酸的生物合成途径及相关基因组特性的研究进展（综述）

聚羟基烷酸（Ｐｏｌｙｈｙｄｒｏｘｙａｌｋａｎｏｉｃ ａｃｉｄｓ,ＰＨＡｓ）是一类由许多原核生物在非平衡生长（如缺乏氮、氧、磷、镁等）条件下合成的细胞内碳源和能源的贮藏性聚合物。根据单体中碳原子数目,可以将ＰＨＡ分为２种类型：①短侧链ＰＨＡ（ｓｈｏｒｔ－ｓｉｄｅ－ｃｈａｉｎ ＰＨＡ,ｓｓｃ－ＰＨＡ）,单体为含３－５个碳原子数的羟基脂肪酸,以聚－ －羟基丁酸［ｐｏｌｙ－　　－ｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｒｉｃ ａｃｉｄ,Ｐ（３ＨＢ）］和聚　－羟基戊酸［ｐｏｌｙ－　－ｈｙｄｒｏｘｙｖａｌｅｒｉｃ ａｃｉｄ,Ｐ （…     

黑曲霉糖化酶的纯化及特性鉴定

采用硫酸铵高饱和度一步沉淀,Sephadex G-25脱盐,DEAE—Toyopearl离子交换层析,Sepharose S—100 HR凝胶过滤法,从黑曲霉糖化酶粗酶液中纯化出电泳均一的糖化酶。其分子量为73～75Kd,等电点为pH3.3,最适pH为4.2,最适反应温度为60℃,对可溶性淀粉的K_m值为7.56。该糖化酶的含糖量为17.9％,此外还测定了其氨基酸组成及含量。     

恶臭假单胞菌由辛酸积累PHA的初步研究

恶臭假单胞菌可以利用辛酸为唯一碳源合成中链聚 3 羟基烷酸 (mclPHA)。在摇瓶条件下 ,对辛酸钠浓度、初始 pH、限制营养因子、通气量对菌体细胞生长和PHA积累影响进行了研究。结果表明 ,对菌体生长而言 ,辛酸钠的最适浓度和最适初始 pH分别为 1.2～ 1.3%和 7.0 ,限制NH 4 可以获得PHA的最大积累量 ,高达细胞干重的 74 %。限制通气量有利于PHA合成     

利用三引物PCR和同尾酶连接的策略实现多基因片段的重组

在构建质外体CaM结合小肽中间载体的过程中,采用了三引物PCR和同尾酶连接法进 行DNA重组,构建了SLR1 BPs信号肽 CaN Cmyc的融合基因的一连体和CaN二连体。结果表 明,三引物PCR方法对多个小基因片段的重组操作方便快速,比酶切、连接方法更具优越性。 而同尾酶连接方法是连接多拷贝基因的有效方法。     

利用溶氧作为控制信号补料分批培养生产PHA的研究

利用已构建的工程菌Escherchia coli XL1-Blue(pKSABC),在20L自动发酵罐里进行补料分批培养。研究表明,底物浓度、温度、pH、DO等参数是影响菌体生长和PHA积累的重要因素;通过补料分批培养可以提高PHA的积累量。通过对DO在发酵过程中的变化规律的分析,确定DO作为补料时间的在线控制信号。补料的原则是,使发酵前期菌体大量生长,发酵后期PHA大量积累。在优化条件下,对工程菌Escherchia coliXL1-Blue(pKSABC)进行了60 h的补料分批培养,菌体浓度、PHA浓度和PHA占细胞干重的百分比分别为179g/L,132g/L,73.7%。     

Ralstonia metallidurans CH34苯酚、甲苯降解基因的生物信息学分析

采用生物信息学方法对Ralstonia metallidurans CH34基因组序列进行了深入分析,推测了参与降解苯酚、甲苯/二甲苯降解的有关基因及功能,编码序列推测结果显示,R. metallidurans CH34中可能存在苯酚、甲苯/二甲苯间位降解代谢途径的基因操纵子及其调节因子和辅助因子,为后续进一步克隆和研究各基因的准确功能提供了有益的信息,奠定了基础.     

工程菌在无机培养基中共培养生产聚羟基烷酸的研究

本研究主要是利用工程菌E.coli XL1-Blue(pKY105)和工程菌E.coli XL1-Blue(pKSSE5.3)以葡萄糖为唯一碳源进行共培养,生产了共聚物(P(3HB-co-4HB)),结果表明,两种工程菌共培养能够获得塑性更强的PHA.     

酰基高丝氨酸内酯——细菌与真核生物之间信息交流的介导分子

许多革兰氏阴性细菌利用酰基高丝氨酸内酯（AHLs）作为胞间信号分子协调细菌群体基因的表达，这一AHLs介导的细菌群体感应系统参与细菌多种生理行为和生物学功能的调控.近年来人们研究发现细菌AHLs也能够影响真核基因的表达，真核生物反过来也可能会通过产生AHL类似物或AHL信号通路中的激活剂或拮抗剂与细菌群体感应系统发生相互作用，意味着细菌和真核生物利用酰基高丝氨酸内酯进行某种形式的信息交流.文中介绍了上述各方面的研究进展.