利用酵母双杂合系统研究Jak3与IL-2Rγ相互作用

白细胞介素－２（ＩＬ－２）受体γ亚基（ＩＬ－２Ｒγ）和非受体型酪氨酸激酶Ｊａｋ３在ＩＬ－２发挥生理作用过程中都发挥着重要的作用,并已知Ｊａｋ３可以与ＩＬ－２Ｒγ或直接或间接地结合,为了研究Ｊａｋ３与ＩＬ－２Ｒγ之间发生直接相互作用的具体区域,构建了这两个分子的各种缺失体,利用酵母双杂合系统研究了各缺失体之间的具体区域,构建了这两个分子的各个缺失体,利用酵母双杂合系统研究了各缺失体之间的相互作用,结     

IL-2内化信号只存在于其受体γ亚基的胞内域

白细胞介素 2 (IL 2 )是一个重要的免疫细胞因子 .它与受体相互作用后激活细胞内一系列信号分子 ,并诱导c myc ,c fos ,c jun及bcl 2等原癌基因的表达 ,从而使细胞增殖和分化 .在这个过程中往往伴随着IL 2内化现象的产生 .受体介导的IL 2内化一方面大大减少了定位在细胞膜上的IL 2受体的数目 ,另一方面则使胞外的IL 2进入细胞并发生降解 ,从而对IL 2的生物活性进行下调控制 .为了确定IL 2受体中专门负责内化的亚基 ,我们构建了一系列由IL 2受体不同亚基的胞内域与胞外域组成的嵌合受体 ,电转染入L92 9细胞建立稳定株并进行IL 2内化检测 .实验结果表明IL 2Rα,β亚基的胞内域都不能单独介导其内化 ,IL 2内化的信号只存在于其受体γ亚基的胞内域中 .另外 ,IL 2受体与IL 2的亲和力的大小亦会影响IL 2内化程度 .     

扁柏精油提取工艺的优化及成分分析

以扁柏(柏树)树叶为原料,采用水蒸气蒸馏法提取柏树精油.设计单因素试验,考察了浸泡时间、蒸馏时间、蒸馏温度以及样品粒径对柏树精油提取得率的影响,并采用正交设计试验优化柏树精油提取工艺,用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对所提产物进行化学成分分析.结果表明,正交试验的优选提取工艺为:浸提时间2h,蒸馏时间3h,加热温度175°C,粒径100目.在该条件下精油得率最高可达0.547%.柏树精油主要成分为5-蒈醇(29.55%)、榄香醇(20.01%)和大根香叶烯(10.86%)等.     

IL-2内化信号只存在于其受体γ亚基的胞内域

白细胞介素-2 (IL-2 )是一个重要的免疫细胞因子 .它与受体相互作用后激活细胞内一系列信号分子,并诱导c-myc ,c-fos ,c-jun及bcl-2等原癌基因的表达 ,从而使细胞增殖和分化 .在这个过程中往往伴随着IL-2内化现象的产生 .受体介导的IL-2内化一方面大大减少了定位在细胞膜上的IL-2受体的数目 ,另一方面则使胞外的IL-2进入细胞并发生降解 ,从而对IL-2的生物活性进行下调控制 .为了确定IL-2受体中专门负责内化的亚基 ,我们构建了一系列由IL-2受体不同亚基的胞内域与胞外域组成的嵌合受体 ,电转染入L929细胞建立稳定株并进行IL-2内化检测 .实验结果表明IL-2Rα,β亚基的胞内域都不能单独介导其内化 ,IL-2内化的信号只存在于其受体γ亚基的胞内域中 .另外 ,IL-2受体与IL-2的亲和力的大小亦会影响IL-2内化程度 .     

利用tet-off诱导表达系统研究Akt的功能

用ＢＡ／Ｆ３β细胞建立了含ｔｅｔ－ｏｆｆ诱导表达系统的细胞株ＢＢＴ,并用对ｔｅｔ－ｏｆｆ应答的荧光素酶报告基因检测证实该系统中基因诱导表达的效果极其显著。随后在ＢＢＴ细胞中转入了对ｔｅｔ－ｏｆｆ应答的Ａｋｔ表达质粒,并筛选了稳定株。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果显示,Ａｋｔ可以极显著地被ｔｅｔ－ｏｆｆ诱导表达。选择了诱导效果最好的单克隆ＢＢＡ进行了Ａｋｔ的功能研究。用ＭＴＴ法检测发现Ａｋｔ可以极显著地抑