钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白SNAT2-HA融合蛋白的构建及鉴定

钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白SNAT2在哺乳动物组织中广泛表达,具有转运中性氨基酸的功能,在谷氨酸-谷氨酰胺循环、肝脏糖质新生等生物通路中发挥重要作用．为了方便测定SNAT2在细胞膜上的表达和定位,本研究采用PCR扩增和酶切连接将HA标签蛋白与SNAT2的C末端连接,构建了真核生物表达载体pBK-CMVA（1098—1300）-SNAT2-HA表达载体．用脂质体转染法将该表达载体瞬时转染到HEK293T细胞中,通过Westernblot法检测到SNAT2-HA融合蛋白在细胞膜上的正确表达和定位．pBK-CMV△（1098-1300）-SNAT2-HA表达载体的成功构建,为今后对SNAT2的结构和功能的研究提供了有效方法．     

我国高校科技成果转化的现状分析

随着我国经济和社会的发展和进步,在创新驱动发展战略的驱动下,科技创新越来越受到社会各界的重视,高校作为一支重要的科研力量,是科技人才和成果的集中地,应该成为我国科技成果的策源地,但是目前高校普遍存在着科技成果转化效率低、科学研究与社会需求脱节等突出问题,未能发挥其应有的作用。本文通过文献调研和走访交流等,了解和分析近年来高校在科技成果转移转化过程中存在的问题和产生的原因,从而提出了改善的建议。     

大鼠中性氨基酸转运蛋白SNAT1-HA融合蛋白的构建和表达(英文)

Na+偶联的中性氨基酸转运蛋白SNAT1是一种膜蛋白,属于转运蛋白第38家族(SLC38),在中枢神经系统(CNS)中起到重要的生理学作用.为了更容易地检测SNAT1在细胞膜上的表达,以pBK-CMVΔ-SNAT1为模板,用PCR,双酶切和T4连接酶连接的方法在SNAT1的C端加上了一个HA标签蛋白,构建了一个新质粒pBK-CMVΔ-SNAT1-HA.用该质粒瞬时转染人胚胎肾细胞(HEK293T),转染36 h以后,融合蛋白SNAT1-HA可以用HA抗体检测.Western blot结果显示在约54 kDa处有一条特异性条带,与预期分子量大小一致.利用重组质粒pBK-CMVΔ-SNAT1-HA可以更方便地检测到SNAT1在细胞膜上的表达与定位,为进一步研究SNAT1结构与功能奠定了基础.     

大鼠中性氨基酸转运蛋白SNAT1-HA融合蛋白的构建和表达(英

Na+偶联的中性氨基酸转运蛋白SNAT1是一种膜蛋白,属于转运 蛋白第38家族(SLC38),在中枢神经系统(CNS)中起到重要的生理学作 用.为了更容易地检测SNAT1在细胞膜上的表达,以pBK-CMVΔ-SNAT1 为模板,用PCR,双酶切和T4连接酶连接的方法在SNAT1的C端加上了一 个HA标签蛋白,构建了一个新质粒pBK-CMVΔ-SNAT1-HA.用该质粒瞬 时转染人胚胎肾细胞(HEK293T),转染36 h以后,融合蛋白SNAT1-HA可 以用HA抗体检测.Western blo