正常成年CBA小鼠短声诱发听性脑干反应测试波形分析

目的:利用不同频率短声刺激正常CBA小鼠,诱发听性脑干反应(Auditory brainstem responses,ABR),分析各波形出现频率、潜伏期、阈值和幅值,找出最适合用于检测CBA小鼠阈值的ABR波,为CBA小鼠听觉研究提供参考依据。方法:对50只CBA小鼠进行短声(click声)诱发ABR测试,分别观察高(90 d B SPL)、中(60 d B SPL)、低(30d B SPL)3个刺激强度下波Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的出现率,阈值的判断使用出现率最高的波,并测量其的潜伏期和幅值。结果:(1)在高中低三个刺激强度下波Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的引出率分别是100%、100%、100%、100%、65%,100%、100%、100%、100%、59%,95%、97%、65%、55%、45%;发现波Ⅱ的引出率最高并且最稳定,相比较其他波而言最适合用来判断反应阈值,其平均阈值为30 d B SPL;(2)观察发现从90 d B SPL逐渐降低到30 d B SPL时,波Ⅱ的潜伏期在2.08~2.35 ms之间,幅值在2.15~1.62μV之间。结论:CBA小鼠短声诱发ABR波Ⅱ引出率最高且最稳定,引出波Ⅱ的刺激声强度应作为其反应阈值的参考标准。     

基于小鼠肝炎病毒研究遗传工程小鼠隔离检疫设计

目的以小鼠肝炎病毒(MHV)为例,研究两种常用小鼠感染MHV后粪便中病毒核酸检测量与血清特异性抗体的变化,探讨实验动物病原微生物感染的检测设计。方法用MHV病毒核酸检测阳性的脏垫料持续饲养C57BL/6和BALB/c小鼠(n=20) 28 d,进行脏垫料接触感染。之后所有小鼠使用无菌垫料进行单笼饲养,每周收集新鲜粪便和血清样本,经Taqman荧光定量PCR(qPCR)和ELISA法检测后进行统计分析。结果对于BALB/c小鼠,采用qPCR法检测时,在实验第21天即有阳性检出(阳性率20%),第28天阳性检出率达到最高,为80%,第42天阳性检出率为50%,至第56天无阳性检出。血清ELISA检测发现,实验第42天才有MHV特异性抗体检出(阳性率为50%)。对于C57BL/6小鼠,采用qPCR法检测时,在第28天和第42天分别从20%小鼠粪便中检出MHV。而采用ELISA法在整个实验期均未检出特异性阳性抗体。结论在隔离检疫和常规病原检测中,建议选用BALB/c小鼠作为哨兵鼠,替代C57BL/6小鼠。由于qPCR法具有早检出和更高检出率的优点,建议在隔离检疫早期采用基于分子生物学的粪样核酸检测法替代ELISA法。