小麦内生多黏类芽孢杆菌hu-4产β-1,3-葡聚糖酶发酵工艺研究

对产β-1,3-葡聚糖酶小麦内生多黏类芽孢杆菌(Paenibacillus Polymyxa)hu-4的产酶工艺进行了研究,通过正交实验建立和优化了hu-4菌株的发酵产酶培养基,确立了最佳发酵工艺.结果表明,以蛋白胨1.8%,酵母膏0.6%,玉米浆1.2%,酵母葡聚糖0.5%,矿质元素混合溶液0.5%为其最佳发酵培养基构成,pH值7.0;在温度32℃,转速200r/min,接种量2%的工艺条件下,发酵周期为36～38h,产酶效果较好.     

灵芝免疫调节蛋白LZ-8及云芝免疫调节蛋白FIP-tvc对几种癌细胞系的抑制活性检测

在体外培养的人非小细胞肺癌A549细胞、人胃腺癌BGC-823细胞、人结肠癌HCT116细胞、人肝癌Hep 3B细胞、人宫颈癌Hela细胞中加入不同浓度的酵母异源表达的LZ-8或FIP-tvc,培养24 h后显微镜下观察细胞形态变化,并用CCK8试剂盒检测细胞存活率,以用来检测灵芝免疫调节蛋白LZ-8及云芝免疫调节蛋白FIP-tvc对几种癌细胞生长抑制能力.结果显示,LZ-8和FIP-tvc在5～10μg/mL浓度时使A549、BGC-823、Hela和Hep 3B细胞贴壁性变差,且CCK8结果显示前3种细胞的存活率有不同程度的降低(80%～95%存活率),而在20μg/mL浓度时FIP-tvc对Hep 3B细胞的存活率开始有明显抑制效果(89%存活率),但对HCT 116细胞的形态无影响,对其存活率也无抑制作用.     

柱状田头菇原生质体制备条件的实验研究

对影响柱状田头菇菌株原生质体制备的条件进行了研究,这些条件包括不同的培养基、不同的温度、不同的pH、不同的酶解时间、不同的菌龄以及不同的渗透压稳定剂.结果表明:液体摇瓶振荡培养5 d的菌丝,以0.6 mol/L的甘露醇或MgSO4作为渗透压稳定剂,采用2%的真菌溶壁酶,在pH为6、温度为31℃的条件下酶解2 h,柱状田头菇菌株的原生质体制备率最高,可达到2.31×106个/mL.     

淀粉酶高产菌株筛选及发酵条件优化研究

从济源市麦田的土壤中筛选工业生产上有潜在应用价值的高产淀粉酶菌株,通过平板初筛和摇瓶复筛,得到高产淀粉酶细菌菌株P11 (2).对其产酶条件进行优化,最终得到最适碳源为可溶性淀粉,最适氮源为酵母粉和蛋白胨组合,加入MgSO4可以促进产酶,加入CaCl2或FeSO4抑制产酶.经正交试验确定培养基的最优组成,优化后的培养基...     

饲料酸化剂——健酸肥的研制及其对畜禽生产性能的影响

在优选饲料酸化剂———健酸肥的配方基础上 ,测定了健酸肥对仔猪饲料 pH值的降低效果 ;通过饲喂实验表明 :0 .15 %～ 0 .2 %的健酸肥对改善断奶仔猪肠道微生物区系、降低腹泻率、提高采食量、日增重等方面都有十分明显的防病促生长效果。健酸肥与复合酶、抗生素、益生素等合用有协同增效作用 ;同时进一步证实 ,健酸肥对生长肥育猪、肉鸡、产蛋鸡的生产性能也有明显促进作用。     

纳豆激酶液体混菌发酵工艺研究

用实验室复合诱变选育的5株产纳豆激酶正向突变菌株,通过随机组合混菌发酵试验,确定了混菌发酵产NK活性最高的菌株组合为CBL-2-7-10-6、DNS-17-3-15-7和L-5-8-15.随后经过一系列正交试验和单因素试验,确定了这3个突变菌株混合发酵的最佳发酵工艺:发酵培养基中葡萄糖质量分数为4%、大豆蛋白胨4%,MgSO₄ 0.04%,CaCl₂ 0.06%,K₂HPO₄ 0.2%,KH₂PO₄ 0.1%;CBL-2-7-10-6,DNS-17-3-15-7和L-5-8-15这3个突变株接种量分别为670、670和1000μL/100 mL;初始pH7.0,发酵温度31℃,摇床转速160 r/min,发酵时间50h.在该条件下,发酵NK酶活性可以达到4 952.33 IU/mL,是本研究单菌株发酵最高酶活(DNS-17-3-15-7的NK活性2 096.57 IU/mL)的2.36倍.     

蛹虫草纤溶酶酶学性质的初步研究

对蛹虫草纤溶酶的酶学性质进行了研究,结果表明,其纤溶活性随温度(≤45℃)的升高和保温时间的延长,逐渐下降,当温度超过50℃时,则随温度的升高和保温时间的延长急剧下降;蛹虫草纤溶酶的最适pH为7.0,在碱性条件下纤溶活性相对稳定;金属离子Ca2+和Fe2+对蛹虫草纤溶酶的活性有显著激活作用;抑制剂中PMSF对蛹虫草纤溶酶活性的抑制作用较小,而Aprotinin、EDAT和EGTA对其纤溶活性均有较显著的抑制作用,说明蛹虫草纤溶酶可能不同于之前报道的纳豆激酶(丝氨酸蛋白酶),而是一种全新的蛋白酶,但对这一点还需要进一步的研究验证.     

趋磁螺菌AMB-l磁小体合成相关基因的克隆及功能分析

为了更清楚的了解趋磁螺菌产磁小体的合成机理和调节途径,用Tn5转座子诱变的方法筛选得到了2株磁小体合成降低的突变株,并克隆了突变株中被插入失活的基因,分别为编码ABC型Fe3+转移系统中的离子结合蛋白的amb3385基因和功能未知的amb3672基因.互补实验表明携带amb3385和amb3672基因的广宿主载体可以不同程度地恢复突变株中磁小体的合成,证明了D.Schüler关于磁小体合成假说的第一个步骤,即Fe3+从胞外向经由Fe3+转运蛋白运输至了胞内.由于amb3672基因比对时未发现特殊相似基因,其功能尚需进一步研究.     

蛋白农药HrpNEcc防治大白菜软腐病试验

对HrpNEcc蛋白农药应用于大白菜软腐病防治的技术参数进行了研究,研究发现,HrpNEcc纯蛋白田间喷洒使用的适宜剂量为6～10mg/m(2)或者使用体积分数为0.017%～0.033%稀释液为宜,对大白菜细菌性软腐病防治率可达90%左右;贮藏期间使用体积分数0.1%稀释溶液对大白菜细菌性软腐病防治率达到75.4%,...     

高活力纳豆激酶制备及贮藏方法的初步研究

在获得高活力纳豆激酶菌株和发酵工艺的基础上,研究了干燥方法、保藏温度、保藏时间等条件对实验室制备纳豆激酶粗酶制剂酶活力的影响,为该制剂的商品价值和有效开发提供了实验数据．结果表明,冷冻干燥、常温干燥两种干燥方式对NK活性的影响不大;干燥状态下的NK具有较强的抗逆能力,室温保藏150d时,NK活性仍可达到原始状态的80％左右;但极端高温等恶劣条件对NK的保藏和活性有较大的负面影响．