内生真菌Penicillium sp.生物碱类次级代谢产物研究

在寻找神农架植物内生真菌活性次级代谢产物的过程中,从七叶一枝花叶片内生真菌Penicillium sp.(NO.64)的马铃薯葡萄糖液体培养(PDB)中分离得到三个生物碱类化合物.通过NMR,MS等波谱学方法鉴定为嘧菌酯(azoxystrobin)1和2及一个线性二肽类衍生物3,3个化合物均为第一次从自然界中分离得到,同时也是第一次从植物内生真菌中获得.     

湖北产蜘蛛抱蛋质量标准研究

对湖北产蜘蛛抱蛋药材(阴干根茎)的水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、薄层色谱、性状、形态、生境、显微结构、化学成分进行定性定量的研究,为湖北产蜘蛛抱蛋质量标准的制定提供一定的依据.常规检查项目按2010年版《中华人民共和国药典》(一部)ⅨH水分测定法中的烘干法、附录ⅨK灰分测定法、附录ⅩA浸出物测定法以及附录ⅥB薄层色谱法进行检查,植物形态、显微结构和药材性状通过常规的显微镜技术和直接观察进行鉴别,其生境通过文献调研和实地考察进行归纳总结,利用化学显色反应对其主要化学成分进行鉴别.结果表明,10批蜘蛛抱蛋样品测定的平均值为:水分12.64%、总灰分6.4%、酸不溶性灰分0.7%、醇溶性浸出物4.8%、薄层色谱显色良好,斑点清晰;性状特点鲜明,容易区分,显微结构给出了在各个生长周期普遍存在的特征性结构,给出了本属植物主要的形态特点;通过鉴别,本品主要化学成分为甾体皂苷,同时对个别检查的限度项提出了建议.研究结果为湖北产蜘蛛抱蛋质量标准的制定提供了一定的依据.     

开口箭根茎中甾体类化合物的研究

目的：研究开口箭根茎中甾体成分,寻找新的抗肿瘤活性物质.方法：运用反相常压柱色谱和制备高效液相对其甾体成分进行分离,通过理化性质和波谱分析方法鉴定其结构.结果：从开口箭根茎的乙醇提取物中分离得到6个甾体皂苷及2个甾体皂苷元,其结构分别为1β,2β,3β,4β,5β-五羟基-螺甾-△25（27）-烯-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（1）,1β,3β-二羟基-5β-孕甾-△16（17）-烯-20-酮-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（2）,1β,2β,3β,4β,5β,6β,7α-七羟基-5β-呋甾-△25（27）-烯（3）,1β,2β,3β,4β,5β,7α-六羟基-6-氧化-螺甾-△25（27）-烯（4）,3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（25S）-1β,3β,5β,26-四羟基-5β-呋甾-△20（22）-烯-26-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）,3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（25S）-1β,3β,5β,22α,26-五羟基-5β-呋甾-26-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（6）,3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（25S）-1β,3β,26-三羟基-5β-呋甾-26-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）和3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-（25R）-1β,3α,26-三羟基-△5（6）-烯-5β-呋甾-26-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（8）.结论：化合物1和2为首次从该属植物中获得.     

睡菜环烯醚萜苷类成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性

为研究睡菜的化学成分,利用溶剂提取法,正、反相硅胶以及葡聚糖凝胶、半制备液相等方法进行分离纯化,结构依据其特征理化性质和波谱数据进行鉴定.从睡菜全草95％醇提物的正丁醇萃取浸膏中共分离得到6个化合物,均为环烯醚萜苷成分,且分别鉴定为:7-epiexaltoside(1)、6",7"-dihydro-7-epiexalt...     

吉祥草根茎中一个甾体皂苷的提取与含量测定

采用醇提、溶剂萃取和色谱分离等手段从吉祥草根茎中分离提取得到一个已知化合物甾体皂苷RCE-4,该化合物具有良好的诱导肿瘤细胞凋亡的作用.该文建立了高效液相色谱技术测定RCE-4含量测定方法,色谱条件为:Venusil XBPC18(250mm×4.6mm.id.,5μm)色谱柱,乙腈-水(45∶55)为流动相,恒定流速为0.8mL/min,检测波长为203nm,柱温25℃.测得吉祥草根茎中RCE-4的含量为0.1229%.RCE-4在0.0325～1.3mg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,r=0.99997,平均回收率为100.05%,RSD(n=5)为1.74%.该方法简便准确,重现性好,可以作为吉祥草中RCE-4的含量测定方法,并为吉祥草药材质量标准建立奠定基础.     

杜英内生真菌Aspergillus versicolor倍半萜类次级代谢产物及(8S)-hydroxysydonic acid的含量测定研究

从植物杜英的叶片中分离得到一株内生真菌,经分子生物学方法鉴定为Aspergillus versicolor,在实验室中以大米麸皮培养基固体培养,40 d后经乙酸乙酯萃取,浓缩得浸膏,经正相硅胶柱,Sephadex LH-20及半制备高效液相色谱分离得到8个次级代谢产物,经核磁共振,质谱等光谱学方法鉴定其结构,分别为(-)-hydroxysydonic acid(1),12-acetoxysydonic acid (2),10-hydroxysydowic acid (3), sydowic acid(4),sydonic acid(5),(S)-(+)-11-dehydrosydonic acid (6),sydonol 1b (7),(R)-hydroxyboivinianic acid (8).化合物1-8中,化合物1的量最大,通过HPLC测定了(-)-hydroxysydonic acid(1)的含量,在固体培养条件下其含量达11.4%.为进一步的开发没药烷类倍半萜类化合物的应用提供了物质保障.     

ICP-MS、GC-MS法研究樟树不同部位的微量元素与挥发油成分

植物微量元素的提取常用微波消解联合火焰原子吸收光谱法、微波消解电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)等;植物挥发油的提取常用传统提取方法有水蒸气蒸馏法、溶剂提取法、压榨法、吸附法等,现代提取方法有同时蒸馏萃取法、超临界CO2萃取法、亚临界水萃取、酶解辅助提取、微波辅助提取法、超声波辅助萃取法、固相微萃取法、联合萃取法等.为研究湖北产樟树皮、茎、干、叶不同部位微量元素及挥发油的成分并对其进行比较,采用电感藕合等离子体质谱法(ICP-MS)测定樟树中各部位微量元素的含量;同时采用石油醚为溶剂用回流提取法分别提取樟树不同部位的挥发油,用峰面积归一化法测其相对含量,气相色谱—质谱联用法(GC-MS)鉴定化学成分.结果表明：测定的14种微量元素在樟树不同部位含量有所差异,但其中Al、Zn和Fe的含量偏高,Co、V、Se、Cd的含量偏低;从樟树树皮、茎、干、叶中分别检测出29、21、27、9种不同成分,共46种成分,均为含氧、烯烃类化合物.树皮中主要成分是黄樟素(36.23%),特征成分是4-isopropyl-1,6-dimethyl-1,2,3,4,4a,7-hexahydro-onaphthalene(1.71%);树干的主要成分是黄樟素(22.45%),特征成分是1-isopropyl-4,7-dimethyl-1,2,4a,5,8,8a-hexahydronaphthalene(1.55%);树茎的主要成分是黄樟素(69.98%),特征成分是(1R,8aR)-1-isopropyl-4,7-dimethyl-1,2,3,5,6,8a-hexahydronaphthalene(2.25%);树叶的主要成α-松油醇(40.73%)和桉树醇(31.96%),特征成分是(1R,4S)-7,7-dimethyl-2-methylenebicyclo[2.2.1]heptane(4.71%).湖北宜昌樟树中不同部位所测微量元素有差异;而樟树树皮、干、茎中所测的重金属元素含量及树叶中除Cu外所测得的重金属元素含量符合药用植物及制剂进出口绿色行业标准的限量标准;樟树不同部位的挥发油成分差别较大,该实验结果为以后的樟树开发利用提供一定的实验依据.     

睡菜水提液对小鼠的急性毒性实验研究

目的：观察睡菜水提液对大鼠的急性毒性.方法：预实验：灌胃给予小鼠水提液剂量分别为2 455、1 841.25、1 380.94、1 035.70 g/L,观察给药当天及7 d内小鼠的状态,计算半数致死量(50%lethal dose, LD₅₀);最大耐受量实验：灌胃给予睡菜最大剂量2 455 g/L,观察给药后14 d内小鼠状态和死亡情况,给药14 d后检测小鼠的血液生化指标、计算主要脏器指数以及观察主要脏器病理学变化.结果：未能测出睡菜水提液的半数致死量.最大耐受量实验显示：给药后14 d内小鼠状态良好,无中毒反应或死亡情况.给药组小鼠第3、7、11、14 d体质量增长与空白组比较无统计学差异(P>0.05);给药组小鼠血液生化指标、主要脏器指数与空白组无统计学差异(P>0.05);组织形态学、组织病理学检查未发现睡菜水提液对小鼠主要脏器产生病理改变.结论：睡菜水提液的最大无毒剂量大于2 455 g/L,是成人临床用药(15 g)的100.6倍,是安全的用药剂量范围.     

利用离子交换法分离草酸青霉发酵液中的三峡肽素

三峡肽素是草酸青霉(Penicillum oxalicum)发酵液中的一种线性五肽,对柑橘类水果的采后致腐菌有强烈的抑制作用,是一种潜在的水果保鲜剂.实验室主要通过发酵液醇沉淀、旋蒸浓缩、液相制备等方法进行小规模分离.为了提高三峡肽素的大规模分离能力,利用732强酸性苯乙烯阳离子交换树脂和D201大孔强碱性阴离子交换树脂对其进行了分离,探索了分离条件,优化了工艺参数,并分析了分离收率.结果表明：离子交换法可有效分离三峡肽素,阳离子交换树脂的最佳上样pH值为3.2,洗脱pH值为9,洗脱盐氯化钠的浓度为0.5 mol/L,收率可达88.42%,且色素和残糖含量较低.阴离子型树脂的收率略高,可达92.92%,其最佳分离条件为上样pH值为10,洗脱pH值为4,洗脱盐浓度为0.1 mol/L,但是去色素和残糖的能力及脱盐效率要弱于阳离子型树脂.     

开口箭均一多糖 TCP-C1-1的结构分析及其生物活性

该文从开口箭根茎部位提取分离开口箭多糖TCP-C1-1，确定其结构并对其生物活性进行研究.实验采用水提醇沉法从开口箭根茎部分离提取多糖，通过Sevage法对80%醇沉部位TCP-C进行纯化，采用DEAE-52 纤维素离子交换树脂和葡聚糖凝胶Sephadex G-200 从TCP-C中进行分离纯化得到多糖TCP-C1-1，采用高效凝胶色谱，TLC薄层层析，红外光谱核磁共振氢谱碳谱等技术对多糖TCP-C1-1结构进行分析.结果分析，从开口箭中分离纯化得到 TCP-C1-1 多糖为果糖组成的均一多糖，连接方式其为β-(2→1)连接，相对分子质量为1.52×104.TCP-C1-1具有良好的生物活性，在浓度为2 mg·mL－1时，其自由基清除率可以达到63.3%.在浓度为6.5 mg·mL－1时，其对α-糖苷酶的抑制率可以达到78.6%.在浓度为1.5 μg·mL－1时，其可以明显促进小鼠单核巨噬细胞 RAW 264.7 的增殖(p＜0.05)，并能明显抑制LPS诱导小鼠单核巨噬细胞 RAW 264.7细胞释放出的 NO.TCP-C1-1为首次从开口箭中分离得到的天然来源的菊粉类果聚糖，为初步研究为开口箭多糖成分的开发提供了一定参考.