猪胰蛋白酶自溶后的活性产物

酶的催化作用起因于分子中某些部位氨基酸残基的特定空间结构,即“活性部位”的存在。使酶分子发生有限度的降解,观察它对酶活性的影响,乃至分离出具有酶活性的降解产物——“活性碎片”,这是研究酶的结构与功能的关系的方法之一。在这方面,胰蛋白酶特别引人注意,因为在一定条件下,无需外加蛋白酶,胰蛋白酶本身就能发生自溶作用;同时胰蛋白酶的高度的专一性对于确定肽链断裂的位置也是很有帮助的。     

猪胰蛋白酶及其自溶活性产物的圆二色性研究

用圆二色性谱(CD谱)研究了猪胰蛋白酶及其自溶活性产物在溶液中的构象,并观察了在十二烷基硫酸钠(SDS)溶液中酶分子构象的变化。 猪胰蛋白酶的CD谱显示有相当量的α-螺旋成份及少量β-折叠成份,它在190nm附近的[θ]值远大于牛胰蛋白酶。其自溶活性产物的CD谱显示α-螺旋的成份减少5—6％,β-折叠成份上升3—6％,而有序部分所占比例基本不变,提示自溶后α-螺旋转化为β-折叠。 在SDS溶液中,α-螺旋和β-折叠在胰蛋白酶分子中所占的比例提高,而α-螺旋成份增加更为明显,表明酶分子的有序度提高。 参照Chou与Fasman以及Chen,Yang与Martinez等人的方法,预测猪胰蛋白酶有36％的氨基酸残基可以形成α-螺旋,由实测CD谱计算,亦在37％左右,两者相符。     

用邻苯二甲醛荧光法检测肽——与茚三酮方法的比较

自Sanger测定胰岛素结构和Moore,Stein测定核糖核酸酶(RNA酶)结构以来,近二十年来蛋白质化学领域发展极为迅速,这些发展的一个重要方面是分析手段的超微量化,使蛋白质化学结构的研究进入一个新阶段。在各种超微量分析技术中,荧光法尤其引人注目。Udenfriend首先引入荧光胺试剂,将氨基酸、肽、蛋白质检测灵敏度提高到微微     

从高考阅卷看生物教学

自从1981年高考恢复生物学考试以来,中学生物课教师的教学积极性和学生学好生物学的积极性都有一定的提高。生物课在中学里开始受到重视,教学质量正在不断提高。但从北京1982年高考生物试卷的情况来看,值得大家思考,研究的问题还很多,就我们在阅卷中所想到的谈谈以下三个问题。