基于网络毒理学的鬼画符致大鼠肝脏损伤作用机制研究

本研究拟探讨鬼画符(Breynia fruticosa)致大鼠肝毒性损伤的潜在作用机制,以高、低剂量鬼画符提取物(5 g/kg、2.5 g/kg)连续3个月和6个月对大鼠灌胃给药,检测血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)水平,以明确鬼画符的毒性靶器官。通过网络毒理学方法,构建鬼画符化学成分库和肝毒性靶标库,利用蛋白互作和网络分析手段筛选鬼画符化学成分致肝毒性的关键靶标,并对关键靶标进行生物功能富集及通路分析,采用免疫组化技术验证鬼画符对大鼠肝脏诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)、白介素-1β (IL-1β)和白介素-6 (IL-6)蛋白表达的影响。结果显示,与对照组相比,鬼画符给药6个月可诱导大鼠肝细胞变性和纤维组织增生的病理变化,ALT、AST水平出现一定程度偏离,但不具有统计学意义。网络毒理学研究初步揭示鬼画符中有17种化合物可能是诱导肝毒性发生的潜在成分,可能通过IL-6、肿瘤蛋白p53(TP53)、丝裂原活化蛋白激酶1 (MAPK1)、血管内皮生长因子A (VEGFA)、肿瘤坏死因子(TNF)等17个关键靶点诱导肝损伤。富集结果显示,鬼画符致肝毒性的关键靶标主要富集于糖尿病并发症相关的AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路、TNF信号通路、Toll样受体信号通路、HIF-1α信号通路等,这些关键蛋白以及通路与细胞内氧化应激、炎症反应密切相关。免疫组化分析结果也验证了鬼画符对大鼠给药6个月可明显升高肝脏中IL-1β、iNOS、IL-6、HIF-1α表达水平,表明鬼画符在一定剂量范围内具有肝毒性,可诱导肝细胞变性,其机制可能与促进肝脏氧化应激损伤和炎症反应,升高氧化应激和炎性相关蛋白的表达有关。     

拟黑多刺蚁、牡蛎提取物抗疲劳作用研究

探讨拟黑多刺蚁（Polyrhachis vicina Roger）、牡蛎（Ostreagigastnunb）提取物（蚁蛎提取物）抗疲劳的作用。选取正常雄性昆明种小鼠,随机分为空白对照组、蚁蛎提取物低、中、高剂量组,灌胃给药30 d,每天1次,观察小鼠负重游泳时间,血清尿素（UREA）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GSH-Px）水平及超氧化物歧化酶（Superocide dismutase,SOD）活性,研究蚁蛎提取物抗疲劳作用。结果发现,与空白对照组相比,蚁蛎提取物组小鼠负重游泳时间显著延长（P<0.05或P<0.01）;蚁蛎提取物低、高剂量组小鼠游泳后小鼠血清UREA浓度显著降低（P<0.05）;蚁蛎提取物各剂量组小鼠血清中的MDA含量和GSH活性均无显著性差异（P>0.05）,但MDA含量有下降的趋势,GSH活性有随着蚁蛎提取物浓度的提高而升高的趋势;蚁蛎提取物高剂量组可显著提高小鼠血清中的SOD活性（P<0.05）。蚁蛎提取物具有一定抗疲劳的作用,其机制可能与其抗氧化应激活性有关。