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将人胰岛素原基因序列(human proinsulin, PI)经密码子优化后与TrxA蛋白融合表达,构建原核表达载体TrxA-PI转入不同大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)、TransB(DE3)和Rosetta-gami(DE3)中。SDS-PAGE显示融合蛋白在3种表达菌株中均有表达,在Rosetta-gami(DE3)中表达量最高,是普通大肠杆菌BL21(DE3)表达量的10倍。通过优化诱导温度等发酵条件,可溶性重组融合蛋白TrxA-PI在Rosetta-gami(DE3)菌株中表达量为3.5 g/L,比未优化时提高约10倍。TrxA-PI用肠激酶酶切后,利用HisTrap FF柱分离纯化PI,经Western-blot检测重组PI具有免疫原性。 相似文献
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通过简单高效的席夫碱反应,成功地将卟啉单元引入到金属铱配合物中,合成了金属铱配合物-卟啉偶联物(TPP-Ir-COOH).该偶联物的光物理性质研究表明,TPP-Ir-COOH在保留了良好的单线态氧产生能力的同时,实现了长波长吸收和发射,解决了金属铱配合物因激发波长短,在用作光敏剂时存在组织穿透性差和容易对生物组织造成伤害等固有缺陷.TPP-Ir-COOH在600～700 nm具有长吸收波长,具有成为优秀光敏剂的潜力,本文为开发具有长吸收波长的铱配合物新型光敏剂材料提供了切实可行的设计策略. 相似文献
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