动物外周血单个核细胞分离方法探讨

目的 探索用人淋巴细胞分离液分离多种属动物外用血单个核细胞（PBMCs）的可行性及评价其分离效果,建立一种适于野外大规模多种属动物PBMCs的分离方法.方法 采用人淋巴细胞分离液分离来源于新疆的伊犁马、新疆驴、不同品种犬、新疆双峰驼、天山马鹿和来源于重庆的荣昌猪、中国荷斯坦奶牛、简阳大耳黑山羊外周血PBMCs.随机抽样检测分离的动物PBMCs细胞总数、细胞纯度和细胞活率.结果 用人淋巴细胞分离液成功分离上述8种动物PBMCs,每毫升动物外周血分离的PBMCs细胞总数为0.52×106～2.03×106个,纯度为67%～93%,细胞活率为92.5%-98.0%.结论 用人淋巴细胞分离液分离多种动物PB-MCs的方法宜在动物的病毒分子流行学调查中进一步推广.     

抑郁模型大鼠海马突触的差异蛋白质组学分析

目的通过抑郁模型大鼠海马突触的差异蛋白质组学分析,为抑郁症发病机制研究提供依据。方法根据糖水消耗基线值将40只健康雄性Sprague—Dawley大鼠随机分为慢性轻度不可预见性应激组和对照组（每组20只）。通过CUMS实验模式建立大鼠抑郁模型后,运用蔗糖密度梯度离心法提取两组大鼠的海马突触并用透射电镜进行检测。采用传统的双向凝胶电泳和基质辅助激光解析电离飞行时间串联质谱进行差异蛋白质组学分析。结果在行为学评价中CUMS组大鼠糖水消耗量和偏好度均降低（P〈0．01）,表明大鼠抑郁模型建立成功。通过结合双向凝胶电泳和质谱分析,共得到6个在CUMS组表达上调和10个在CUMS组表达下调的蛋白质,这些蛋白质的功能主要归为四类,即囊泡调节／递质释放／信号转导、能量代谢、细胞骨架、物质代谢。结论通过对抑郁模型大鼠海马突触的比较蛋白质组学分析及后续的蛋白质功能预测,发现了一些与突触传导功能障碍可能相关的蛋白质,从而为抑郁症发病机制的研究提供了有价值的线索。