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人酸性成纤维细胞生长因子的高效表达 总被引:11,自引:0,他引:11
构建能高效表达人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)的基因工程菌,优化产物分离纯化条件,并对纯化产物进行理化性质鉴定,采用PCR方法扩增haFGF cDNA,将该cDNA片段插入表达载体pET3c的表达框架中,筛选得到了重组质粒pET3c-haFGF,转化大肠杆菌BL21(DE3),构建了表达菌件BL21(DE3)/pET3c-haFGF.IPTG诱导表达,通过离子交换,肝素亲和两步层析的方法分离纯化产物,用MTT法测定产物的活性,haFGF的表达量约为20%,经过两步层析纯化,获得了电泳纯的haFGF样品,纯化haFGF样品的比活性为ED50小于4.0ng/mL.BL21(DE3)/pET3c表达系统能高效表达haFGF,经过纯化得到了理化性质及生物活性与天然haFGF对照品一致的重组人酸性成纤维细胞生长因子。 相似文献
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重组人酸性成纤维细胞生长因子促进大鼠烫伤愈合的研究 总被引:8,自引:1,他引:8
目的:研究重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)促进大鼠烫伤创面愈合的作用。方法:采用大鼠背部深II度烫伤模型,将3种不同浓度的rh-aFGF溶液隔日一次滴注于创面,观察伤后不同时间的创面面积变化和病理组织学改变。结果:rh-aFGF可明显加速大鼠皮肤创伤的愈合,使创面面积明显缩小(P<0 05)。病理组织学检查发现,rh-aFGF组创面伤后7d成纤维细胞生长活跃、数量多,其毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于溶媒对照组;伤后14d,创面收缩与再上皮化明显,新生上皮向创面中心爬行较快。结论:外用rh-aFGF对大鼠深II度烫伤创面有明显的促愈合作用。 相似文献
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抗菌肽AD基因的改造及在毕赤酵母中的表达 总被引:14,自引:0,他引:14
采用PCR技术改造抗菌肽AD基因,将其C末端改造为Asn编码,改造后的抗菌肽Cecropin AD基因克隆到pPICZα-A载体上,构建成酵母重组分泌型表达载体,转化毕赤酵母(Pichia pastoris)受体菌GS115中,采用zerocin抗性标记筛选重组转化子,经摇瓶发酵,浓缩发酵液进行酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析和抑菌活性检测。结果表明,改造后的Cecropin AD基因在毕赤酵母中获得了表达,表达产物经α-Factor信号肽引导分泌到胞外,具有较强的杀菌活性。 相似文献
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新型抗菌肽基因设计,合成及其在酵母中的表达(Ⅰ):杂合抗菌肽基 … 总被引:4,自引:0,他引:4
郑青 《华南理工大学学报(自然科学版)》1998,26(3):60-63
以化学合成并证实抗菌活性和抗菌谱都高于天然抗菌肽的杂合肽CecropinA1-11D12-37的氨基酸序列为基础,选用酵母高频使用密码设计了一种新型抗菌肽基因。 相似文献
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本文着重介绍了两种转包机匣类零件高效铣削加工的工艺改进过程,对高速铣削所采用的刀具和切削参数的优化进行了详细的分析,对高效铣削中所遇到的问题和所采取的对策进行了较为详细的阐述,对数控程序、加工参数、刀具选择等方面进行研究,达到高效加工的目的,提高零件加工的效率和降低加工成本。 相似文献
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从接受美学视角解释异常翻译现象 总被引:1,自引:0,他引:1
郑青华 《邵阳高等专科学校学报》2011,(3):65-67
接受美学与翻译理论研究有着天然的内在联系。接受美学探讨读者对作品的理解、反应和接受以及阅读过程对创作过程的积极干预。但由于期望视野的不同,不同的译者对源作的解读也不尽相同,因而有些文本存在着一些异常翻译现象。接受美学很好地解释了某些异常翻译现象,也在一定程度上促进了翻译理论研究的发展。 相似文献
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人类抗砷相关基因hARRG全长cDNA的克隆和在E.coli中表达 总被引:2,自引:0,他引:2
通过对构建的人胎脑cDNA文库进行大规模测序,发现一条人类新基因,序列与仓鼠asr2序列高度同源,达88%,命名为人类抗砷相关基因(human arsenic resistance related gene.hARRG),hARRG与抗砷基因相关序列ARS2(AF082871)几乎完全全同源,仅比它短253bp,hARRG并不是全长基因而仅是一个cDNA片段,为了获得hARRG全长cDNA,运用Northern blot电子RACE和5-SMART-RACE的方法克隆了一条2999bp 的hARRG全长cDNA,通过Unigene染色体定位于7q21.3,经过生物信息学分析发现,该cDNA有完整的读码框,编码一个788个氨基酸的蛋白,预计分子质量为89.2ku,并在大肠杆菌中获得了成功表达。 相似文献
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酸性成纤维细胞生长因子对人脐静脉血管内皮细胞一氧化氮生成的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:观察人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)及其非促分裂型突变体(nmhamF)对人脐静脉血管内皮细胞(HEC)一氧化氮(NO)生成的影响。方法:实验分3组,分别为haFGF组、nmhaFGF组和对照组。用Griess反应法检测细胞培养上清NO相对含量(N嘎)。结果:haFGF和nmhaFGF都能诱导内皮细胞NO的生成,但同样条件下,nmhaFGF组诱导产生NO的相对含量与对照组比较在0.10、1.00、10.00、50.00、100.00ng/mL时均高(P〈0.01)。与haFGF组比较在0.10、1.00、10.00、50.00ng/mL时nmhaFGF组诱导产生NO的相对含量明显下降(P〈0.01),在0.01和100.00ng/mL时也有降低(P〈0.05)。结论:nmhaFGF仍保留一定的诱导内皮细胞产生NO的作用,但NO生成量有显著下降。 相似文献
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本文描述了贫困生的现状和当前高校贫困生工作中常见办法及其存在的问题。对做好贫困生工作提出了一些新的见解和办法,对高校的贫困生工作有一定的指导和借鉴意义。 相似文献