里氏木霉几丁质酶基因的克隆及其同源转化研究

丝状真菌里氏木霉(Trichoderma reesei)外切几丁质酶具有β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性.根据里氏木霉基因组数据库获得了一个编号为21725的外切几丁质酶nagl基因序列,根据检索结果,从里氏木霉QM9414基因组DNA中克隆获得1.9kb的基因片段.构建了以cbhl为启动子和终止子的重组质粒pCbhNag,与含有pyr4基因的质粒pSKpyr4共转化里氏木霉pyr4缺陷株RutC30△U3.共得到99个转化子,初筛得到5株乙酰氨基葡萄糖苷酶酶活较高的转化子,其中N3菌株的β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶酶活可达26.65 U/mL,而出发菌株的胞外几丁质酶几乎无酶活.成功实现了里氏木霉几丁质酶的克隆及同源表达.     

粘菌肌动蛋白的体外聚合及HMM标记

肌动蛋白是所有真核生物细胞骨架蛋白的重要成分之一,它在细胞中通过聚合,组装成微丝骨架,对于维持细胞的形状、细胞的运动如胞质流动,细胞器运动,甚至细胞的分裂等重要生命活动起着重要作用.多头绒泡菌(physaRum polycephalum,简称粘菌)是一种低等真核生物,它具有许多典型的细胞运动特征如胞质的穿梭运动,原生质团的迁移、吞食运动,原生质团的分裂等.其中胞