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水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus, VSV) L蛋白是该病毒复制酶的主要成分, 分子量约为241 kD. 通过构建L蛋白缺失突变体与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因的方式, 将融合蛋白置于T7启动子或CMV启动子下游, 在多种动物细胞中瞬时表达了重组的融合蛋白. 荧光显微镜观察结果显示, 仅保留N端96个氨基酸残基或缺失N端120个以上残基时, 融合蛋白均匀分布于整个细胞质中, 而含有N端120个以上残基时, 融合蛋白呈点状或局部分布于核周围部位. 截取L蛋白96~120氨基酸片段, 连接到GFP蛋白氨基端, 同样融合蛋白亦特异性地分布到核周围局部区域. 进一步研究含定位信号的25个残基片段发现, 仅13个残基的肽段QGYSFLHEVDKEA(108 ~ 120)就具有定位功能, 缺失D或V均导致定位信号完全丧失. 含有这13个残基的GFP融合蛋白, 在多种细胞和不同表达模式下均显示了同样的分布规律, 表明L蛋白N端这种定位信号具有独立的定位功能, 并且在不同细胞中是保守的. 相似文献
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根据中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis ) EST序列信息设计引物,用RT-PCR方法,从经热休克处理的中国明对虾的肝胰腺RNA中克隆到长2090 bp的hsc70 cDNA序列,包括长1956 bp的完整编码序列(complete CDS)及部分5’端和3’端非翻译区(5’UTR 和3’UTR)。PCR及测序结果分析显示hsc70 cDNA的1~547 bp碱基所对应的基因组序列可能含有内含子,548~2090 bp碱基所对应的基因组序列不含内含子。根据编码序列推导出相应的652个氨基酸,与其他真核生物HSP70家族成员进行同源性比较,发现中国明对虾HSC70与虹鳟(Oncorhynchus mykiss) HSC71、人(Homo sapiens) HSC70、家鼠(Mus musculus )HSP70、烟草天蛾(Manduca Sexta )HSC70的相似性分别是85.9%、85.9%、85.8%、85.4%,表现出较高的保守性。表达分析显示,hsc70 mRNA在中国明对虾正常肝胰腺、肌肉、眼柄、血细胞、心脏、卵巢、肠和鳃等组织存在,并呈组成性表达;受到整体热休克后的对虾肌肉组织hsc70 mRNA水平(以β-actin mRNA水平为内标)与对照组没有显著的差异。 相似文献
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教师是教学过程的组织者与主导者,在教学过程中起关键作用;新的教学理念要求教师作为学生学习的辅助指导者,启发、引导学生的学与练,充分发挥学生的主体作用.提高武术教学水平,首先要研究教师的教育思想、理念及现实状况. 相似文献
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随着社会的不断进步,经济的飞速发展,人们的生活水平和生活方式有了大幅度的提高和改变,我们逐渐步入了信息化时代。固然,信息化时代离不开计算机,当今时代迫切要求人们掌握计算机技术,逐步实施其在教育工作中的应用。因此,本文针对当今计算机技术的普遍应用及结合笔者工作实际情况,浅析其对教育工作所产生的影响并提出相关对策。 相似文献
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