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人组织型纤溶酶原激活剂(t—PA)。DNA重组在表达质粒pDR720中,在E.coliC600中获得了表达,表达水平为2%.以醋酸钟显色PAGE凝胶回收t—PA表达条带,进行复性处理.R性产物经Benzamidine—Sepharose4B,Lysine—Sepharose4B亲和层析,纯化得到SDS—PAGE银染一条带纯度,比活为为4,000mol/s·g的人t—PA. 相似文献
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以胸腔渗出液为来源,用硫酸铵分级沉淀,DEAE—cellulose离子交换柱层析和快速蛋白质液相分离仪纯化了C—反应性蛋白。纯化的C—反应性蛋白经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳、Ouchterlony免疫扩散及快速蛋白质液相分离鉴定,纯度达100%。用这种纯化的C-反应性蛋白(CRP)免疫山羊所得的抗-CRP抗血清特异性好,用抗血清制就的CRP检测板和日本(KW)CRP检测板作对照测试,经060例验证,作Radit分析,P>0.05,表明两者质量无显著性差异。 相似文献
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马心细胞色素C(以下简写为Cyt·C)与K_2PtCl_4的反应混合物在Sephadex G-75上分出4个组分,对应于Cyt·C寡聚体、三聚体、二聚体及单体,此结果与SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(以下简写为SDS-PAGE)测定的各组分的分子量相一致,这揭示了K_2PtCl_4与Cyt·C存在多位点修饰,而非如Kostic报道的Met-65为其唯一修饰位点,此结论通过分析K_2PtCl_4与His-33羧甲基化的Cyt·C修饰反应产物所证实,同时也和同样条件下游离His,Met与K_2PtCl_4的配位作用相吻合,对Cyt·C二聚体衍生物的还原电位、紫外-可见光谱以及二阶导数傅利叶变换红外光谱研究表明,血红素周围的电子环境仍然保持完整,但其二级结构有较大的扰动. 相似文献
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本文提供了一个研究蛋白质和金属配位的工作体系。用绿豆胰蛋白酶抑制剂为配体,铁为中心原子,采用三种反应体系进行配位,在最佳反应条件下,此蛋白质分子和Fe形成稳定的2Fe—2S~*簇状配合物,此配合物具有天然植物型铁氧迅蛋白的典型紫外吸收光谱,但不具有传递电子的活性。在不打开S—S键的条件下,Fe只和蛋白质分子的末端羧基有很弱的配位。 相似文献
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本文介绍了一种抗凝新药——肝素钙的新工艺,该工艺是国内首创,方法简单,质量稳定,便于推广。 相似文献
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用11%醋酸在68℃,条件下处理肝素钙,当肝素钠盐和钙盐分子中约25%的 N-硫释放出来,相应的有25%的氨基暴露,肝素钠盐的抗凝血活性完全消失,肝素钙盐则失活约75%。相同条件下肝素钠盐和钙盐净化脂性血浆的活性不受酸水解的影响,由此提供了一个简易制备改构肝素的方法 相似文献
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朱德煦 《南京大学学报(自然科学版)》1965,(1)
辅脱氢酶Ⅱ,谷胱甘肽和抗坏血酸在豌豆种子发芽早期,均主要以还原型存在,还原型在总量中所占比例都以发芽24小时为最高。测定了豌豆种子发芽期间谷胱甘肽还原酶,脱氢抗坏血酸还原酶,抗坏血酸氧化酶,以及多酚氧化酶的活力。发现前两个酶的活力在种子发芽早期始终存在,並且都在发芽24小时活力最高,后两个酶的活力分别在发芽38小时和48小时才出现。推测NADP—GSH—AA体系在豌豆种子发芽早期中主要起无氧呼吸的作用,相应地,在代谢类型上,豌豆种子在发芽早期亦以不需氧的EMP途径为主。 相似文献
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重组人尿激酶原的工业化制备与性质研究 总被引:5,自引:5,他引:0
将含有 pET2 9a prouk重组质粒的人尿激酶原工程菌经 10L种子罐培养及 10 0L发酵 ,IPTG诱导表达 ,其表达量为占菌体总蛋白的 2 0 % ,表达产物经体外变复性 ,CM 纤维素离子交换层析 ,Superdex 75分子筛层析及Affi preppolymyxinsupport亲和层析去热源 ,每 10 0L发酵液得重组人尿激酶原纯品 6g ,纯度达 95 %以上 ,比活大于 1.2× 10 4 IU /mg ,双链含量低于0 .5 % ,内毒素及热源含量、宿主蛋白残留量、宿主DNA残留量等均达到临床使用标准 .其分子量 (质谱测定 )、氨基酸组成、N、C 端氨基酸序列分析等均与理论值相符 .进行了等电点及肽图等性质研究 相似文献