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通过CRISPRi基因编辑技术构建阿拉伯糖基转移酶基因A(embA)低表达海分枝杆菌突变株,利用qRT-PCR技术检测相关基因转录水平。突变株侵染巨噬细胞后,台盼蓝染色测定细胞存活率,稀释涂布法检测胞内活菌数量。免疫荧光染色观察感染后巨噬细胞中F-actin细胞骨架重排和吞噬小泡的形成。分别通过Western blot和细胞因子悬液芯片方法验证小鼠巨噬细胞J774A.1胞内髓样分化因子88(Myeloid Differenti-ation factor, MyD88)表达量和细胞因子分泌。结果显示:对数生长中期野生型海分枝杆菌中glfT2和embA基因表达量增加。embA低表达突变株中embB,glfT2等6个阿拉伯半乳聚糖合成基因显著下调,但菌体形态和长度不变。与对照菌株相比,突变株侵染J774A.1巨噬细胞24 h后,细胞存活率和胞内CFU上升,吞噬小泡和骨架蛋白无明显变化。胞内MyD88蛋白表达水平增加,分泌性炎症因子TNF-α、IL-6和趋化因子RANTES、MIP-1α水平上升。本研究提示,embA表达量下降会降低海分枝杆菌的细胞毒力,但不会直接改变巨噬细胞吞噬病原菌的生理过... 相似文献
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采用来自5种脊椎动物的8种血细胞、7种微生物单细胞、5种藻类细胞,对4种海产腹足纲动物凝集素进行筛选,均检测到凝集活性。绵羊红细胞、啤酒酵母、紫球藻对凝集反应最为敏感。4种动物凝集素普遍不耐高温,60℃或65℃下15min即全部失活,凝集反应的适宜pH为6.5-8.0,其凝集性能可能分别被不同的糖所抑制,但均可被0.02mol/LEDTA抑制。 相似文献
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利用大多数双歧杆菌具有半乳糖苷酶且活性较高的特性.在改良的MRS培养基中加入X-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-半乳糖苷)作为显色底物.产生颜色反应,进而从市售酸奶中分离出3株双歧杆菌, 并对其中的1 株进行生长曲线的绘制及培养基成分的优化, 为今后双歧杆菌产品的开发及生物学功能的探索奠定基础. 相似文献
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针对取自某工厂的一株未知乳酸菌种进行菌株的培养条件优化及菌种鉴定.以乳酸菌在不同固体培养基中的菌落数、菌落大小及溶钙圈大小为检测指标确定乳酸菌分离培养基为最优乳酸菌固体培养基.在此基础上,对其固体和半固体形式中的生长情况进行比较,发现半固体培养较固体培养更适于乳酸菌生长.通过对乳酸菌生长曲线、pH-t曲线的绘制,了解了此种乳酸菌的生长特性.通过菌落形态观察以及生化鉴定实验.如:吲哚试验、接触酶试验、运动性检测、糖发酵试验等鉴定出此种乳酸菌为德氏乳杆菌保加利亚亚种. 相似文献
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家谱档案从古至今都是一种非常重要的史实记录,它不仅具有自然生命文化的意义,也具有社会历史文化的意义。然而,在编修家谱档案时却存在着不少问题。该文建议编修家谱应该坚持严谨的科学态度,保证家谱档案的连续、完整,从而使家谱能够更充分地发挥历史研究与使用价值。 相似文献
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为了提高下脚料的综合利用率,用4种商业蛋白酶对章鱼下脚料进行水解,并初步分析检测产物中的氨基酸和抗氧化多肽.实验结果表明:动物蛋白酶水解液中的复合氨基酸获取率占总氨基酸的57.12%,达到57.12%;而4种蛋白酶水解产物中肽类物质的·OH清除力IC50均小于1.28 mg·mL-1,Fe2+螯合力IC50均小于2.82 mg·mL-1,还原力随多肽质量浓度增加而提升;这种工艺条件和方法可以同时获取两类活性物质(复合氨基酸、抗氧化性多肽), 相似文献
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4种软体动物凝集素的细胞凝集性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
从4种软体动物肌肉中获得凝集素粗提液.用人的四种血型红细胞和三种动物红细胞检测其凝集活性,结果表明,每种软体动物凝集素至少凝集6种以上的红细胞.兔血红细胞对凝集素最敏感.能够和兔血细胞发生凝集反应的海螺丝、缢蛙、毛蚶、四角蛤蜊凝集素提取液的最小蛋白浓度分别为0.67μg/ml,0.78μg/ml,0.29μg/ml和0.49μg/ml。6种微生物细胞或孢子不能与凝集素样品发生凝集反应。 相似文献
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本文借鉴现代教学理论与方法,依据软式排球技术的特点及教学的基本规律,对软式排球教学的指导思想、教学顺序、教学的重点与难点、教学组织形式、教学方法等五个方面进行了理论思考。 相似文献
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首先,以章鱼内脏为原料,通过单因素实验,分析pH值、温度、料液比、抽提时间对提取粗酶液中酸性蛋白酶活性的影响.然后,通过响应面法优化,得到多项式拟合回归方程,并对酶活的预测值和实测值进行验证.最后,测定粗酶液中蛋白酶的种类和活性.结果表明:酸性蛋白酶的最优抽提条件为pH值5.0、温度30 ℃、时间2.5 h、料液比1∶5,由此得到的粗酶液酶活为917.2 nkat·g-1,对应比活为28.5 nkat·mg-1;响应面回归方程计算的预测值与实际值位于误差范围内,说明该方程具有预测作用;粗酶液中,蛋白酶大部分为酸性蛋白酶,占总蛋白酶76.0%. 相似文献